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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20度
- 保质期:
2年
- 英文名:
pQE-51
- 库存:
100
- 供应商:
kelei-bio
- 规格:
20μl
启动子: T5
复制子: ColE1 ori
终止子: Lambda t0 terminator;rrnB T1
质粒分类: 大肠杆菌载体;pQE系列表达质粒
质粒大小: 3437bp
原核抗性: 氨苄青霉素Amp
克隆菌株: DH5α
培养条件: 37℃,有氧,LB
表达宿主: M15
诱导方式: IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物: pQE30-F: AGCGGATAACAATTTCACACAG
3'测序引物: pQE30-R: TTCTGAGGTCATTACTGGATC
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文献和实验出所需的重组质粒。 仪器、材料与试剂 一、仪器 1.恒温摇床 2.恒温水浴 3.恒温培养箱 4.小型高速离心机 二、材料 1. 氨苄青霉素 2. BamHI 3. HindIII 4. T4 DNA连接酶 5. pQE-31 和pUC18-CAT 质粒 6. 培养皿 7. 接种针 8. 金属涂棒 9. 1.5mL 离心管 10.酒精灯 11.镊子、灭菌牙签等 三、试剂 DNA琼脂糖胶纯化试剂盒 实验步骤 一、质粒
时有助于保持稳定6×组氨酸DHFR标签在小鼠和大鼠中的免疫原性不高,所以与之融合的重组蛋白不需要把标签切除,可以直接进行免疫或者表位测图QIAexpress系列都是用pQE载体进行的,作为德国出品的东西,它具有德国人一贯的严谨性,各方面都考虑得比较周全。pQE载体都是以T5启动子起始转录-翻译系统的,pQE 是pDS家族的一员,来源于pDS56/RBSII和pDS781/RBSII-DHFRS。这些低拷贝质粒都有以下特征:优化的启动子-操纵元模式,包括来自噬菌体的T5启动子(由大肠杆菌的RNA
后,2000倍稀释大量培养。 含有疏水基团的重组蛋白往往对宿主菌有毒性。因此,除非有特殊的意义,应当去除插入片段中编码信号肽序列或穿膜区的序列。然而,也有少数包含信号肽的蛋白可以在膜间质少量的表达。这种情况下,建议诱导前培养温度降低为25度。 有些蛋白,尤其是小于10KDa的蛋白在E. coli中不稳定,可能很快被细菌中的蛋白酶降解。克服这种困难的方法包括:降低培养温度到30度;使用一种或多种蛋白酶缺陷的宿主菌;使用QIAGEN公司的表达质粒pQE-16、pQE-40,使生成目标多肽与DHFR的融合
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