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- 2025年07月10日
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- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
2年
- 英文名：
pUC119
- 库存：
100
- 供应商：
kelei-bio
- 规格：
20μl
启动子: Lac/lac
复制子: ColE1 ori
质粒分类: 大肠杆菌载体；克隆质粒
质粒大小: 3162bp
质粒标签: LacZ
原核抗性: 氨苄青霉素Amp
克隆菌株: DH5α
培养条件: 37℃，有氧，LB
5'测序引物: M13R:CAGGAAACAGCTATGACC
3'测序引物: M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT
备注: 蓝白斑筛选，产生单链DNA
质粒简介
pUC119载体是利用pUC19载体的Nde I 酶切位点，插入含有M13 phage DNA Intergenic region (IG) 的HgiA I (5645) - DraI (5941) 片段构建而成的。由于在lacZ基因中含有多克隆位点，因此在含有IPTG、X-Gal的平板培养基上可以很容易地通过蓝白筛选判断载体中有无DNA片段的插入。同时还可以通过载体上的lac promoter表达外源基因，使用M13系列的通用引物对插入载体中的DNA片段进行测序。使用Deletion Kit for Kilo-Sequence (Code No. : 6030) 可以对克隆得到的数千碱基的DNA片段进行测序。 由于pUC119载体中插入了M13 phage DNA的Intergenic region (IG)，因此pUC119载体还可以在Helper phage M13K07的感染下产生单链DNA，包入Phage颗粒内后从菌体内放出，而不存在Helper phage单链DNA的污染。使用本制品时，可以稳定获得单链的长片段DNA (~7kb)，并且没有缺失。
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μL 体系 2× MasterMix 25 μL 上游 Primer （ 10 μM 1-5 μL 下游 Primer （ 10 μM ） 1-5 μL 模板 lamid DNA ～ 50 ng genomic DNA ～ 1000 ng cDNA ～ 500 ng 粗提液 ～ 2 μL 灭菌蒸馏水至 50 μL PCR 扩增实例： 一、plasmid DNA 扩增 1．提取的质粒 DNA 扩增 以pUC19 质粒为模板扩增 100，250，500
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