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- 文献和实验
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冷藏
- 保质期:
长期
- 英文名:
Multi One Step Cloning Kit
- 库存:
796
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒销*(代"售"),我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒销*(代"售")
规格:10T
品牌:百奥莱博
编号:SY0280
产地:国产|进口
英文名:Multi One Step Cloning Kit
本产品是一款简单、快速、高效的多片段DNA定向克隆产品,该试剂盒可以将PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点。将载体在克隆位点进行线性化,并在插入片段PCR引物5’端引入线性化克隆载体末端序列,使得插入片段PCR产物5’和3’最末端分别带有和线性化克隆载体两末端对应的完全一致的序列 (15 bp~20 bp)。将这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化克隆载体按一定比例混合,在重组酶Exnase的催化下,仅需反应30 min即可进行转化,完成定向克隆。克隆阳性率可达95%以上。克隆载体酶切产物或PCR产物和插入片段PCR产物可以不进行DNA纯化直接用于重组克隆,极大的简化了实验步骤。
试剂盒中包含有针对多片段重组反应而优化的反应缓冲液和重组酶Exnase。使用该试剂盒,可以一次实现多至5个片段的顺序拼接克隆。Exnase还兼容常规酶切、PCR反应体系。
该试剂盒可用于多片段拼接克隆、全基因合成和DNA定点突变。
产品组份:
5×CE Buffer——————40 μl
Exnase——————20μl
pUC 19 control vector, linearized (50 ng/μl)————5μl
Control insert Mix(0.5 kb, 10 ng/μl; 1 kb, 20 ng/μl; 2 kb, 40 ng/μl)————5μl
实验流程概览
1) 线性化克隆载体制备;
2) 插入片段扩增引物设计;
3) 插入片段PCR扩增;
4) 进行重组反应;
5) 反应产物转化、涂板;
6) 克隆鉴定.

我公司的多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒销*(代"售"),性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
ARB10184 人α2抗纤溶酶(α2-AP)检测服务 Human α2-antiplasmin,α2-ap ELISA KIT
BTN130804 单细胞裂解液(RNA) Single Cell Lysis Solution
BTN131070 牛血清白蛋白标准品 BSA Standard
ARB12622 大鼠维生素B6(VB6)免费代测 Rat vitamin b6,vb6 ELISA KIT
BL1261 核酸纯化柱(RNA专用)
PY08-068 改良马丁培养基 225ml 20瓶/箱,用于生物制品霉菌检验
ARB12350 大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)含量分析 Rat urokinase plasminogen activator,upa ELISA KIT
BL0885 兔抗猪IgG免疫血清 0.5ml
ARB11196 人组织型纤维溶酶激活物(t-PA)血清中含量检测 Human tissue-type plasminogen activator, t-pa ELISA KIT
ARB11031 人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)Elisa分析 Human arabinogalactan proteins,agps ELISA KIT
蛋白酶(枯草杆菌) Sodium propionate 9014-01-1
ARB10781 人抗弓形体IgM抗体(Anti-tox IgM)酶联免疫定量检测 Human anti-toxoplasma igG antibody,anti-tox igG ELISA KIT
胞苷 Murexide 65-46-3
多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒销*(代"售")关键词:快速/无缝,多片段一步法,多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒,SY0280,Multi One Step Cloning Kit
·HRP标记小鼠抗β-actin单克隆抗体
编号:SY0634
英文名称:HRP-conjugated β-actin, Mouse mAb
规格:100μl(>200次)
本品为HRP标记的 小鼠抗β-actin单克隆抗体。推荐稀释倍数:WB(1:4000)
产品类型:小鼠单抗(Mouse Monoclonal, mAb)IgG; Mouse IgG1
反应性:人、小鼠、非洲绿猴
应用:WB
克隆号(Clone NO.):2F3
免疫原:偶联到KLH上的合成多肽【D(Ac)DDIAALVIDNGSGLC】
储存缓冲液:含50%甘油的PBS,pH7.3
储存条件:-20℃。
·牛胰岛素
编号:SY0459
英文名称:Insulin (From Bovine)
规格:25mg
我司提供的牛胰岛素是通过多次硫*(代"酸")铵和等电点沉淀的方法从牛胰腺的乙醇/磷酸提取物中纯化获得,常用作细胞培养的辅助成分,常见使用浓度为1-10 μg/ml。
胰岛素是胰腺中胰岛β细胞分泌的一种双链形式(α,β)的多肽激素,由51个*基酸组成,分子量约5800 Da。两条链间通过二对二硫键连接,而α链自身还含有一对二硫键。胰岛素是目前已知的机体内唯一能降低血糖的蛋白激素,不仅负责调控细胞对葡萄糖、*基酸和脂肪酸的摄入,利用和储存,而且抑制糖原,蛋白质和脂肪的降解发生。
不同物种胰岛素功能大体相同,只是*基酸组成上的差异。人胰岛素结构见下:

牛胰岛素不同于人胰岛素的*基酸位点是:α链中的第八个*基酸(α8)用丙*酸(A)替代苏*酸(T),第十个*基酸(α10)用缬*酸(V)替代异亮*酸(I)。β链中C末端用丙*酸(A)替代苏*酸(T)。
CAS:11070-73-8
纯度:≥95% (HPLC)
分子式:C254H377N65O75S6
分子量:5733.5
外观:白色或浅黄色粉末
活性(potency):≥27 USP units/mg
锌含量(Zinc Amount ):~0.5%(若实验要求去除锌离子,可将胰岛素溶解在稀醋酸内,加入过量EDTA螯合锌离子,然后等电点沉淀纯化胰岛素)
溶解性:不溶于水,溶于稀醋酸或稀盐*(代"酸")(pH 2-3)
等电点(pI):pl = 5.3 (天然蛋白)
沉降系数(S20,w)
(Sedimentation Coefficient):1.95 x 10-13
扩散系数(D20,w)
(Diffusion Coefficient):7.30 x 10-7
EM(278nm):6080(33 mM phosphate,pH 7.0)
E1%(278nm):10.6(33 mM phosphate,pH 7.0)
序列:A-Chain: G-I-V-E-Q-C-C-A-S-V-C-S-L-Y-Q-L-E-N-Y-C-N
B-Chain:F-V-N-Q-H-L-C-G-S-H-L-V-E-A-L-Y-L-V-C-G-E-R-G-F-F-Y-T-P-K-A
储存条件:-20℃干燥
多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒销*(代"售")关键词:快速/无缝,多片段一步法,多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒,SY0280,Multi One Step Cloning Kit
·2×PCR Plus Master Mix(不含染料)
编号:SY0029
英文名称:2×PCR Plus Master Mix (No Dye)
规格:5×1ml
PCR Plus Master Mix (No Dye)包含Taq Plus DNA Polymerase,dNTP以及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化实验的操作步骤,提高了高通量操作和实验结果的重现性。Mix中不含有*酚蓝染料,其中的保护剂使得Mix 经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。PCR产物的3’端带A,可轻松克隆至T载体。
质量控制
核酸外切酶残留检测:20 μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸外内酶残留检测:20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时, DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中,以ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
功能检测:50 μl体系中,以20 ng人基因组DNA为模板扩增α-1-antitrypsin基因。30个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,观察到单一的1 Kb条带。
·SRE-Luc荧光素酶报告基因质粒
编号:SY0103
英文名称:SRE luciferase reporter plasmid
规格:1μg
SRE荧光素酶报告基因(报告基因质粒)(SER luciferase reporter plasimd)是用于检测SRF调节的信号通路活性的的报告基因。三重复合体TCR/Elk1/SRF结合到SRE进行基因表达的调控。
SRE报告基因主要用于检测细胞中SRF调节的信号通路的活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMSRE-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个SRE结合位点,可以高灵敏度地检测SRE的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小,使得SRE报告基因更易于转染。
质粒图谱

注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
使用说明
pGMSRE -Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
储存条件:-20℃。
我公司生产供应销*(代"售")的克隆与表达正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒销*(代"售")。
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文献和实验液,37度150r/min温和振荡培养60min,涂布,室温放置约20分钟后放于37度恒温培养箱过夜培养(17-20h)。 更多相关链接(生物谷) 试剂库 >> 克隆与表达 >> 感受态细胞 试剂库 >> 细胞 >> 感受态细胞 试剂库 >> 克隆与表达 >> 克隆试剂盒 试剂库 >> 克隆与表达 >> 转化 试剂库 >> 细胞培养 >> 培养基/琼脂混合物 试剂
上篇我们对经典分子克隆技术和无缝组装克隆技术进行了比较,经典分子克隆兜兜转转、如琢如磨,而无缝组装克隆技术却能做到操作简单和方便快捷。那它究竟是如何实现的呢?本期我们就来具体聊聊无缝克隆的四步致胜奇招。 无缝组装克隆之 Step 123——带你飞,把还在用传统方法“琢磨”的他甩在后面 基于同源序列的无缝组装克隆技术,关键是利用 PCR 引物,在目标片段两端引入与线性化载体两端同源的一段序列。基本策略是 选定插入外源片段的位置,以此线性化载体 设计包含线性化载体两端序列和目标片段两端序列的引物
一、Lighteningssembly Cloning Kit 传统克隆方法:引物设计合成、PCR、连入克隆载体、酶切获得插入片段,酶切获得线性载体,连接获得重组质粒。需酶切,引物设计受酶切位点限制;需连入克隆载体;步骤多,耗时长;效率低。 北京康碧泉公司代理的Gene-Foci试剂盒的克隆方法:引物设计合成、PCR获得插入片段,PCR或酶切获得线性载体,连接获得重组质粒。无需酶切,引物设计不受酶切位点限制;无需连入克隆载体;步骤少,速度快;高连接效率,高阳性克隆
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