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定制包装AAV-高纯浓缩(服务编号AAV003~008)

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定制包装AAV-高纯浓缩(服务编号AAV003~008)
  • ¥7800 - 128000
  • 包装生产客户定制的AAV,提供经超速离心高度纯化的AAV浓缩液0.5 mL,保证滴度1E+13 GC/mL以上。适合in vitro及in vivo实验。
  • 广州
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  • 商家诚信度 
  • 入驻年限  2年
  • 广州科学城黄埔区揽月路3号国际企业孵化器G栋304

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  • 提供商: 派真生物
    服务名称: 定制包装AAV-高纯浓缩(服务编号AAV003~008)
    规格: AAV002:≥2E+12GC/AAV003:≥5E+12GC/AAV004:≥1E+13GC/AAV005:≥2E+13GC/AAV006:≥5E+13GC/AAV007:≥1E+14GC/AAV008:≥2E+14GC
    规格: AAV002:≥2E+12GC 产品价格: ¥7800.0
    规格: AAV003:≥5E+12GC 产品价格: ¥9800.0
    规格: AAV004:≥1E+13GC 产品价格: ¥15800.0
    规格: AAV005:≥2E+13GC 产品价格: ¥25800.0
    规格: AAV006:≥5E+13GC 产品价格: ¥45800.0
    规格: AAV007:≥1E+14GC 产品价格: ¥82800.0
    规格: AAV008:≥2E+14GC 产品价格: ¥128000.0

    AAV简介
    腺相关病毒(Adeno-associated virus, AAV)是一种单链DNA的小病毒,依赖于其它病毒复制,比如腺病毒(图1为 AAV 3D结构)。 到目前为止,虽然有超过80%的人口携带AAV,但还未发现AAV与任何疾病相关。重组腺相关病毒(Recombinant AAV,rAAV)是经工程改造的AAV载体,它剔除了AAV全部编码蛋白Rep或Cap基因的序列,只在载体的两端有作为包装信号的145bp 反式DNA序列(图2为野生型与重组AAV)。rAAV感染细胞后其载体序列会形成首尾相连的环状DNA,整合宿主基因组的概率极低。与整合宿主基因组的慢病毒/逆转录病毒相比,应用rAAV可以不必担心整合基因组产生的突变导致癌症。自1984年始,第一个rAAV载体被证明能转导外源基因进入哺乳动物细胞内,从此rAAV就作为传递基因的载体被应用于生命科学研究。1990年,FDA认可rAAV是可应用于临床的安全基因传递载体。

    rAAV优势

    1. 安全性最高  相比慢病毒(Lentivirus)和腺病毒(Adenovirus),腺相关病毒有突出的安全优势:极低基因组整合概率;极低免疫原性;实验操作安全性为最安全的一级(外源基因不涉及原癌基因、有毒基因的载体)。
    2. 长效转导 过去20年中rAAV作为高效及长期表达基因的载体在基础研究及临床基因治疗领域广泛使用。至今录有的最长的灵长类肌肉内表达时间有10年以上。
    3. 多样的组织倾向性  通过修饰、突变AAV的外壳蛋白序列产生新的组织倾向性的AAV血清型,目前文献中已经存在数千的突变型血清,具有极广的可选择性。下图1为通过尾静脉注射小鼠传导的AAV9-EGFP在各主要器官中的表达情况。
    如何选择rAAV血清型
    感染活体动物
       由于相同的AAV血清型在啮齿类动物及灵长类动物中的转导倾向性不一样,目前对灵长类的不同AAV血清型的研究还不完整。因此这里只针对小鼠而言,简单地说就是AAV 9、AAV rh10能进行全身性传导;通过静脉注射能穿越血脑屏障进入脑部的有AAV9、AAV rh10,及新近出现的突变体AAV PHP.B,据实验数据显示AAV PHP.B效率达到AAV9的40倍;肝脏中AAV8最好,AAV9、AAV rh10都不错;心脏以AAV9、AAVrh10为首选;骨骼肌以AAV9、 AAV rh10为首选;胰腺以AAV8、9最好;眼睛中AAV2、4、5、6、7、9都有大量应用文献,针对不同细胞类型有各自差异或优势,较为突出的是AAV9可通过尾静脉注射感染RPE细胞;肺以AAV5、9最优;骨髓来源或免疫细胞AAV9有相关报道。详情请参照rAAV血清型选择表1。(在文献中对各组织最优AAV血清型可能存在不同观点,敬请甄别。此处观点仅供参考。)

    注:红色勾为推荐血清型。

    感染培养细胞
       针对体外培养的细胞,简单的选择有:AAVDJ, 能感染超过80%的常规培养细胞;AAV6,对血液来源的细胞感染能力最强。请参考来自文献的表2数据*。

     
    服务流程:

    质控方式:
    1. 多重酶切鉴定生产病毒所用质粒   
    2. 平行生产AAV-CAG.EGFP.WPRE.SV40pA
    3. 荧光探针QPCR标准曲线精确定量。
           
    1. SDS-PAGE电泳与考马斯亮蓝染色确定纯度 

             
        

    官网
    链接http://www.packgene.cn

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