科研级AAV病毒包装

腺相关病毒（AAV）是一种非致病性的单链 DNA 病毒，因其诸多独特优势，已成为科研领域的重要工具，更在基因与细胞疗法中作为遗传有效载荷递送的理想候选者备受瞩目。其显著特点如下：一是目前并无明确证据表明 AAV 会导致任何疾病；二是 AAV 感染所引发的免疫反应极为轻微；三是 AAV 既能够感染分裂细胞，也可感染非分裂细胞；四是重组腺相关病毒（rAAV）能够在无需将目标基因（GOI）整合至宿主基因组中的情况下，驱动 GOI 的长期稳定表达。此外，不同 AAV 血清型因其衣壳结构的差异，在感染宿主细胞时表现出不同的组织或细胞特异性倾向，为实现针对性的感染提供了可能。

派真生物致力于为各类基于 AAV 的项目提供优质高效的 AAV 包装服务。我们凭借自身研发的一系列专有技术，对 AAV 的生产流程进行了全面优化，在提升 AAV 产量滴度的同时，也显著增强了其纯度、效力及产品一致性，全方位保障了 AAV 产品的卓越品质，从而为您的科研及应用项目提供坚实可靠的支持，助力相关研究与实践的顺利推进。

关键优势

快速交付：AAV总量5E+13 GC以内可在6~9个工作日交付

保证滴度：交付滴度≥1E+13 GC/mL

高纯度：AAV纯度95%以上

高产量：高达 1E+16 GC

低内毒素：<10EU/mL，适用于体内实验

低空壳率：<30%

血清型丰富：可提供90+不同的AAV血清型，覆盖大脑、心脏、眼睛、肌肉、肝脏、肺脏、肾脏等多种组织器官

经验丰富：10+年专业AAV生产经验，成功交付20,000+批次 AAV病毒

载体设计支持：博士级专家和 piVector Designer 线上工具

 

如何选择适合纯度的AAV？

	AAV初纯浓缩液	AAV高纯浓缩液
如何选择？	应用于对AAV纯度要求不高的培养细胞水平实验。细胞实验推荐使用对大部分细胞都具有高感染能力的AAV-DJ，或偏好感染骨髓来源细胞的AAV6血清型。	高纯、高滴度AAV会带来理想的动物实验效果以及适合绝大多数培养细胞水平实验。
制备与质控	用中等生产规模生产、收获AAV后进行超速离心得到经初纯步骤的浓缩AAV（溶于DMEM培养基），以SYBR Green qPCR对AAV滴度进行精确定量，	通过超纯提取质粒、三质粒共转染HEK293细胞、浓缩AAV、超高速梯度离心纯化，并以SYBR Green qPCR对AAV滴度进行精确定量，每次测量以ATCC的AAV标准品为基准作系统校正，确保滴度在国际标准体系内，以SDS-PAGE电泳考马斯高蓝染色方式对AAV纯度进行测定。

                                 
                        

动物实验rAAV血清型推荐

 

AAV针对体外细胞的感染效力

针对体外培养的细胞，简单的选择有AAV-DJ与AAV6。AAVDJ能感染超过80%的常规培养细胞，AAV6对血液来源和其它种类细胞感染能力最强。

 

经典案例分享
案例1：MicroRNA-20b通过抑制Mfn2介导的器官间钙离子流动从而引起心肌肥大

哈尔滨医科大学药学院的研究人员通过心肌肥大的小鼠和细胞模型发现，miR-20b可以引起胞质钙离子浓度上升并导致心肌肥大，通过rAAV9-抗miR-20b载体可以逆转由miR-20b引起的心肌增厚。

图1，A：经TAC处理的小鼠和假实验小鼠的左心室EGC检测厚度；B：Mfn2水平在TAC小鼠和Ang II处理的心肌细胞中下调

图2，D,E：miR-20b水平在TAC小鼠和Ang II处理的心肌细胞中上调

参考文献：Yue Qiu,1,4 Rongchao Cheng,2,4 Chaoqi Liang,1 Yuan Yao,1 Wenhao Zhang,1 Jie Zhang,1 Mingyu Zhang,1 .“MicroRNA-20b Promotes Cardiac Hypertrophy by the Inhibition of Mitofusin 2-Mediated Inter-organelle Ca2+ Cross-Talk.”Mol Ther Nucleic Acids. 2020 Mar 6; 19: 1343–1356.

案例2：开发CRISPR系统抑制AAV免疫反应并预防和治疗败血症研究

来自匹兹堡大学（University of Pittsburgh）的Mo R. Ebrahimkhani、Samira Kiani等科学家（均为派真生物客户）通过基于CRISPR的转录调控系统来控制基因的表达，短暂抑制与产生AAV抗体相关的基因，从而抑制AAV免疫反应，让具有基因治疗功能的AAV病毒毫无阻碍地进入递送基因，直至发挥治疗作用。

参考文献：Farzaneh Moghadam ,1,2,3 Ryan LeGraw,1,2,3 Jeremy J Velazquez, 1,2,3 Nan Cher Yeo,4,5 Chenxi Xu,6 Jin Park,6 Alejandro Chavez,7 Mo R Ebrahimkhani,8,9,10,11 Samira Kiani,12,13,14,15.“Synthetic immunomodulation with a CRISPR super-repressor in vivo.”Nat Cell Biol. 2020 Sep;22(9):1143-1154.