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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20ºC
- 保质期:
2年
- 英文名:
2×Hieff Canace High-Fidelity PCR Master Mix
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
100μL
产品信息
| 产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格(元) |
| 2× Hieff Canace® PCR Master Mix 高保真酶预混液 |
10136ES01 |
100 μL |
86.00 |
| 2× Hieff Canace® PCR Master Mix 高保真酶预混液 |
10136ES03 |
1 mL |
526.00 |
| 2× Hieff Canace® PCR Master Mix 高保真酶预混液 |
10136ES08 |
5×1 mL |
1426.00 |
| 2× Hieff Canace® PCR Master Mix 高保真酶预混液 |
10136ES25 |
25×1 mL |
5626.00 |
产品描述
2× Hieff Canace® PCR Master Mix是即用型2×预混合溶液,包含Hieff Canace® High-Fidelity DNA Polymerase,dNTP以及优化的缓冲体系。Hieff Canace® High-Fidelity DNA Polymerase是新一代的高保真DNA聚合酶,具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性,其保真性是Taq DNA聚合酶的52倍,是普通Pfu DNA聚合酶的6倍。扩增速度可达15 sec/kb。适用于复杂模板的扩增,扩增产物为平末端。

2× Hieff Canace® PCR Master Mix具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,反应体系只需加入引物和模板即可进行扩增,简化了实验操作步骤,减少了人为误差,提高了实验通量和结果的重复性。本产品中不含染料,PCR产物需加入Loading buffer 后进行电泳。另外,该产品还含有特异保护剂,使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。
产品应用
基因克隆;复杂DNA模板扩增;高通量建库。
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存。有效期2年。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
2)本产品仅作科研用途!
推荐PCR反应体系(冰上配制)
| 组分 |
体积 |
终浓度 |
| ddH2O |
to 50 μL |
- |
| DNA模板 |
适量 |
- |
| Primer正向 (10 μM) |
2.5 μL |
0.5 μM |
| Primer反向 (10 μM) |
2.5 μL |
0.5 μM |
| 2× Hieff Canace® PCR Master Mix |
25 μL |
1× |
【注】:
1)聚合酶终浓度:在1×预混液含有1 U/50 μL的聚合酶。
2)引物:PCR反应体系中引物终浓度的范围为0.2-1 μM,推荐0.5 μM。
3)Mg2+、dNTP终浓度:在1×预混液含有1.5 mM Mg2+和200 μM的dNTP。
4)高GC模板:在体系中加入终浓度为3%的DMSO可能有利于扩增。
5)不同模板的推荐使用量(50 μL反应体系):
| 模板种类 |
扩增片段1 kb-20 kb |
| 基因组DNA |
50 ng-200 ng |
| 质粒或病毒DNA |
10 pg-20 ng |
| cDNA |
1-5 μL (不超过PCR反应总体积的1/10) |
PCR扩增程序设置
| 循环步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
| 预变性 |
98℃ |
0.5-3 min |
1 |
| 变性 |
98℃ |
10 sec |
30-35 |
| 退火 |
60℃ |
20 sec |
|
| 延伸 |
72℃ |
15-30 sec/kb |
|
| 终延伸 |
72℃ |
5 min |
1 |
【注】:
1)预变性温度和时间:推荐使用98℃。预变性推荐时间:质粒DNA等简单模板为30 sec;cDNA、基因组DNA等复杂模板为3 min;高GC含量模板为5-10 min。
2)退火温度和时间:推荐使用60℃,也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为20 sec,可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。
3)延伸温度和时间:推荐使用72℃。延伸时间推荐如下:质粒DNA等简单模板为15 sec/kb;cDNA、基因组DNA等复杂模板为30 sec/kb,根据实际情况可延长至40 sec/kb。
4)扩增产物:请将PCR扩增产物放置于-20℃保存,防止该酶降解扩增产物。扩增产物为平末端,产物直接用于克隆,请使用平末端连接载体。
应用实例

图1: Hieff Canace® 高保真PCR预混液扩增2.1 kb-6 kb目的片段。所有基因片段均可实现高特异性、高产量扩增。模板:拟南芥基因组DNA,50 ng/50 μL;退火温度:60℃;延伸时间:30 sec/kb。M:1 kb ladder; 1:2.1 kb;2:3.1 kb;3:4.2 kb;4:5 kb;5:6 kb。
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| 产品名称 |
货号 |
规格 |
| 10135ES60/76/80 |
100/500/1000 U |
|
| 10907ES20 |
20 T |
|
| 10908ES20 |
20 T |
|
| 10909ES20 |
20 T |
|
| 10910ES20 |
20 T |
|
| 10911ES20 |
20 T |
|
| 10912ES10 |
10 T |
|
| 11003ES10 |
10 T |
|
| 11004ES10 |
10 T |
HB210831
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- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验[2] Chen JJ, You XJ, Li L, et al. Single-Base Resolution Detection of Adenosine-to-Inosine RNA Editing by Endonuclease-Mediated Sequencing. Anal Chem. 2022;94(24):8740-8747. doi:10.1021/acs.analchem.2c01226(IF:6.986)










