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|
| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | ||
| 10X FastDigest® Buffer | 20X oligonucleotide (0.01 mM) | 10X FastDigest® Green Buffer | ||||
| FD1744 | 50 µl (50 react.) | 1.00 ml | 0.02 ml | 1.00 ml | FD1744 | |
Reaction conditions
| Reaction temperature | Digestion time with 1µl of FastDigest® enzyme, min | bp from end of DNA required for complete digestion | Thermal inactivation | Incubation time without star activity, hours | |||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Lambda, 1µg/20µl | Plasmid DNA, 1µg/20µl | PCR product, ~0.2µg/30µl | Genomic DNA, 1µg/10µl | ||||
| 37°C | 15 | 15 | 60 | 20 | 5 | 65°C, 5 min | 16 |
Lambda DNA
0.7%琼脂糖
41 切割位点
配方
1 µl (1 FDU)是指在37°C,1X FastDigest® 缓冲液中15分钟内酶切1 µg lambda DNA所需的酶量。
推荐反应条件
1X FastDigest®缓冲液或 1X FastDigest® Green 缓冲液 + 0.5 µM寡核苷酸 , 37°C。
1 µl FastDigest® BspMI (BveI)可在
– 15分钟内酶切1 µg lambda DNA;
– 15分钟内酶切1 µg质粒DNA;
– 60分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
– 20分钟内酶切1 µg基因组DNA。
1 µl FastDigest® BspMI (BveI)可在
– 15分钟内酶切1 µg lambda DNA;
– 15分钟内酶切1 µg质粒DNA;
– 60分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
– 20分钟内酶切1 µg基因组DNA。
备注
- FastDigest® BspMI (BveI)有效酶切要求底物DNA分子中至少有2个识别位点。
- 反应体系中加入0.5 μM寡核苷酸 (含有BveI识别序列)可极大地促进质粒DNA酶切效率,尤其是只有1个识别位点的底物DNA分子。BveI很难完全切割某些底物DNA。
商业化同裂酶
采用REsearch™软件寻找同功酶。
甲基化影响
Dam: 无重叠 – 不影响。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 可能重叠 – 部分影响。
EcoKI: 可能重叠 – 影响不确定。
EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 可能重叠 – 部分影响。
EcoKI: 可能重叠 – 影响不确定。
EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。
| Methylation type | Sequence | Cleavage effect |
|---|---|---|
| CpG | 5'...ACCTGm5C G ...3' |
部分影响 |
| Lambda | ΦX174 | M13mp18/19 | pBR322 | puc18/19 | pUC57 |
|---|---|---|---|---|---|
| 41 | 3 | 3 | 1 | 1 | 0 |
| pTZ19R/U | pTZ57R | pBluescriptIIKS(-/+) | pBluescriptIISK(-/+) | pACYC177 | pACYC184 |
| 1 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 |
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FastDigest® BspMI (BveI)
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