FastDigest® BspMI (BveI)

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  • Thermo scientific -fermentas
  • FD1744
  • 2025年09月24日
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      大量

    • - 推荐的缓冲液 : FastDigest®缓冲液
    • - 需要寡核苷酸
    • - 孵育温度37°C
    • - 连接效率90%
    • - CpG甲基化重叠可能影响DNA切割
    • - 热失活65°C, 5 min
    • - 重组酶
    • - 蓝/白鉴定
    • - LO合格
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    10X FastDigest® Buffer 20X oligonucleotide (0.01 mM) 10X FastDigest® Green Buffer
    FD1744 50 µl (50 react.) 1.00 ml 0.02 ml 1.00 ml FD1744
    Reaction conditions
    Reaction temperature Digestion time with 1µl of FastDigest® enzyme, min bp from end of DNA required for complete digestion Thermal inactivation Incubation time without star activity, hours
    Lambda, 1µg/20µl Plasmid DNA, 1µg/20µl PCR product, ~0.2µg/30µl Genomic DNA, 1µg/10µl
    37°C 15 15 60 20 5 65°C, 5 min 16

    Lambda DNA
    0.7%琼脂糖
    41 切割位点

    配方
    1 µl (1 FDU)是指在37°C,1X FastDigest® 缓冲液中15分钟内酶切1 µg lambda DNA所需的酶量。

    推荐反应条件
    1X FastDigest®缓冲液或 1X FastDigest® Green 缓冲液 + 0.5 µM寡核苷酸 , 37°C。
    1 µl FastDigest® BspMI (BveI)可在
    – 15分钟内酶切1 µg lambda DNA;
    – 15分钟内酶切1 µg质粒DNA;
    – 60分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
    – 20分钟内酶切1 µg基因组DNA。

    备注
    • FastDigest® BspMI (BveI)有效酶切要求底物DNA分子中至少有2个识别位点。
    • 反应体系中加入0.5 μM寡核苷酸 (含有BveI识别序列)可极大地促进质粒DNA酶切效率,尤其是只有1个识别位点的底物DNA分子。BveI很难完全切割某些底物DNA。

    商业化同裂酶
    采用REsearch™软件寻找同功酶。

    甲基化影响
    Dam: 无重叠 – 不影响。
    Dcm: 无重叠 – 不影响。
    CpG: 可能重叠 – 部分影响。
    EcoKI: 可能重叠 – 影响不确定。
    EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。

    Methylation type Sequence Cleavage effect
    CpG

    5'...ACCTGm5C G ...3'
    3'...TGGAC Gm5C ...5'

    部分影响
    Number of recognition sites in DNA molecules
    Lambda ΦX174 M13mp18/19 pBR322 puc18/19 pUC57
    41 3 3 1 1 0
    pTZ19R/U pTZ57R pBluescriptIIKS(-/+) pBluescriptIISK(-/+) pACYC177 pACYC184
    1 0 0 0 0 1

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