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- 近岸蛋白(Novoprotein)
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- 2025年09月27日
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近岸
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3000U
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· 核酸外切酶III说明
核酸外切酶III能作用于双链DNA，沿3’→5’方向逐步切去单核苷酸。核酸外切酶III与底物的每次结合，只切除最末的几个核苷酸，从而对双链DNA产生渐进缺失。最适底物是平末端或3’凹陷末端DNA，核酸外切酶III亦可作用于双链DNA的切刻产生单链gap，对于对单链DNA无活性。3’突出末端抗该酶的切割，拮抗程度随3’突出末端的长度而改变，四碱基或更长的突出完全不能被切割。这种特性对于一端是抗性位点（3’突出端）一端是敏感位点（平端或5’突出端）的线性DNA分子，可以产生单向缺失。例如，可将双链DNA用产生不同末端的限制性内切酶双酶切后，利用Exonuclease III的3′→5′的外切酶活性，从一端降解，得到互补的单链DNA和5′-P单核苷酸。与BAL 31 Nuclease相比，本酶的碱基特异性较小，如在富含GC的位置上，由于反应停止的机率较低，可用于DNA的Deletion制作。
本核酸外切酶III是把exonuclease III基因( E. coli)在大肠杆菌中进行表达后，经多次纯化分离而得到的。
· 质量保证
本核酸外切酶III经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。
· 使用建议
核酸外切酶III不能切割硫代磷酸的桥连。因此，也可以通过引入一个硫代磷酸核苷酸将DNA分子的一端位点保护起来，再创建单向缺失。
· 其他说明
详细内容请参考说明书
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文献和实验在核酸水解酶中，是具有从分子链的末端顺次水解磷酸二酯键而生成单核苷酸作用的酶，与核酸内切酶相对应。可大致分为水解磷酸二酯键的 3′端生成 5′ -单核苷酸的酶，及水解 5′端生成 3′ -单核苷酸的酶。前者有蛇毒磷酸二酯酶及大肠杆菌核酸外切酶Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ等；后者有脾脏磷酸二酯酶、嗜酸乳杆菌（ Lac-tobacillus acidophilus）核酸酶。这些酶中还可以区别出从分子链的 3′末端或 5′末端开始切断和对单链 DNA或双链 DNA具有特异作用的酶。可利用这些酶水解
脾脏核酸外切酶spleen exonuclease，spleenphosphodiesterase
亦称脾脏磷酸二酯酶（spleen phosphodieste- rase）。系将具有 5′ -OH末端的 DNA和 RNA，从 5′末端向 3′方向不断使 3′ -核苷酸游离分解的酶。 EC3． 1． 16． 1。常从牛脾脏提纯的此种酶。高分子 DNA不易水解，但用 DNaseⅡ或普氏微球菌（ Micrococ-cus pyogenes）核酸酶处理，则可以完全水解。对碱基序列无特异性，但在 5′末端有磷酸单酯基则不水解。反应不需要 Mg2 ，但最适 pH在有 2× 10
切割成多个具有特定长度和结构的小片段RNA(大约21～23 bp)，即siRNA。siRNA在细胞内RNA解旋酶的作用下解链成正义链和反义链，继之由反义siRNA再与体内一些酶(包括内切酶、外切酶、解旋酶等)结合形成RNA诱导的沉默复合物(RNA-induced silencing complex，RISC)。RISC与外源性基因表达的mRNA的同源区进行特异性结合，RISC具有核酸酶的功能，在结合部位切割mRNA，切割位点即是与siRNA中反义链互补结合的两端。被切割后的断裂mRNA随即降解
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