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- Thermo scientific -fermentas
- EN0581
- 2025年11月04日
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大量
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| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS |
| 10X Reaction Buffer | ||||
| EN0581 | 4000 u (20 u/µl) | 1.00 ml | EN0581 | |
| EN0582 | 20,000 u (20 u/µl) | 5 x 1.00 ml | EN0582 | |
| EN0587 | 1000 u (20 u/µl) | 1.00 ml |
- Features
-
- 在Fermentas公司的PCR缓冲液中有活性。
- Applications
-
- 除去PCR混合物中引物，应用如下：
一 测序(2)，见操作方法;
一 同试管内"大引物"PCR突变(3)。 - 从核酸混合物中去除含有3’-羟基末端的单链DNA。
- 分析是否含存在有3’-羟基末端的单链DNA (4)。
- 除去PCR混合物中引物，应用如下：
说明
Exonuclease I (ExoI)按3’=>5’方向降解单链DNA，逐步释放脱氧核糖核苷5’-单磷酸并保留完整的5’-末端的二核苷酸，见图1。该酶不能切割末端3’-OH基团被磷酰基或乙酰基封闭的DNA链(1)。
来源
含大肠杆菌sbcB 克隆基因的大肠杆菌。
分子量
54.5 kDa，单体。
活性单位定义
1个活性单位是指在37°C、30分钟催化释放10 nmol酸性可溶性核苷酸所需的酶量。
酶活性分析混合物：67 mM glycine-KOH (pH 9.5), 6.7 mM MgCl2 , 1 mM DTT, 0.17 mg/ml单链[3 H]-DNA。
保存缓冲液
保存缓冲液组分：
20 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT和50% (v/v)甘油。
20 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT和50% (v/v)甘油。
10X 反应缓冲液
670 mM glycine-KOH (pH 9.5, 25°C), 67 mM MgCl2 , 10 mM DTT。
质量控制
相关测试表明无内切或双链外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染。
抑制与失活
- 抑制剂： 20% (w/v) PEG 8000 (5)。
- 失活：80°C加热15分钟。
备注
该酶不适合除去dsDNA的3’-突出末端。
图1。Exonuclease I 活性。
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Exonuclease I (Exo I)
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