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- Thermo scientific -fermentas
- B43
- 2025年11月04日
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DNase I, RNase-free
| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | |||
| 10X Reaction Buffer with MgCl2 | 50 mM EDTA | 100 mM MnCl2 | 10X Reaction Buffer w/o MnCl2 | ||||
| EN0521 | 1000 u (1 u/µl) | 1.00 ml | 1.00 ml | EN0521 | |||
| EN0523 | 1000 u (50 u/µl) | 1.00 ml | 1.00 ml | EN0523 | |||
| EN0525 | 1000 u (1 u/µl) | 1.00 ml | 1.00 ml | 1.00 ml | 1.00 ml | EN0525 | |
10X Reaction Buffer with MgCl2 for DNase I
| Catalog# | Size, concentration | Certificate of Analysis |
| B43 | 1 ml | B43 |
- Features
-
- 基因重组酶。
- 以低剂量的内源核糖核酸酶从非动物来源的宿主中纯化。
- Applications
-
- 制备不含DNA的RNA (1)。
- 体外转录后，除去模板DNA (1)。
- RT-qPCR，RT-PCR前，制备不含有DNA的RNA模板 (2)。
- 在DNA Polymerase I协同作用下，缺口平移标记DNA (1)。
- DNase I (RNase-free)足迹分析方法研究DNA和蛋白的相互作用(1)。
- 产生含有随机重叠DNA插入的基因文库，反应缓冲液中含有Mn2+ (3)。
酶活性严格依赖于Ca2+ ，受Mg2+ 和Mn2+ 离子激活，见图1：
– Mg2+ 离子存在时，DNase I按统计学意义的随机方式在dsDNA任意单链的不同位置独立切割(1)；
– Mn2+ 离子存在时，DNase I几乎在双链DNA 的相同位置切割，产生平末端的DNA片段或者具有1-2个碱基突出末端的DNA片段(1)。
酶活性分析混合物：40 mM Tris-HCl (pH 8.0), 10 mM MgSO4 , 1 mM CaCl2 , 1 µg pUC19 DNA.
1个DNase I活性单位大致相当于0.3个Kunitz unit (4)。
50 mM Tris-acetate (pH 7.5), 10 mM CaCl2 和50% (v/v)甘油。
- 抑制剂：金属螯合剂、毫摩尔浓度的过渡金属(如Zn)、SDS(即使浓度低于0.1%)、还原剂(DTT和β-巯基乙醇)、超过50-100 �mM的离子强度。
- 失活：EGTA或EDTA (1 mol Mn2+ /Mg2+ (5)相应添加1 mol EGTA/EDTA)存在时， 65°C加热10分钟。
备注
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- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验Ribonuclease A (RNase A), DNase-free
FeatureThe RNase A is free of DNase activity. It is not necessary to heat it before use.DescriptionThe Ribonuclease A (RNase A) is an endoribonuclease that specifically degrades single-stranded RNA at C and U residues. It cleaves the phosphodiester
Preparation of RNase-Free DNase by Alkylation
with electrophoresis. DNase treatment makes the mixture more soluble, even if DNA degradation is only partial.
,000 x G for 1 minute 2) For each HiBind® RNA Minicolumn, prepare the DNase I digestion reaction mix as follows: OBI DNase I Digestion Buffer 73.5ul RNase-free DNase I (20 Kunitz unites/ul) 1.5ul Total volume 75ul
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