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- Thermo scientific -fermentas
- EP0061
- 2025年11月03日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS |
| 5X Reaction Buffer | ||||
| EP0061 | 100 u (5 u/µl) | 0.35 ml | EP0061 | |
| EP0062 | 500 u (5 u/µl) | 2 x 1.00 ml | EP0062 |
- Features
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- 对单链DNA的3’=>5’外切核酸酶活性比双链DNA强；其3’=>5’外切核酸酶活性比DNA polymerase I, E.coli (1)和Klenow fragment高200倍。
- 在Fermentas公司所有限制酶、PCR和RT缓冲液中有活性。
- Applications
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- DNA末端平端化：5’-突出末端补平或3’-突出末端的切除(1, 2)。
- PCR产物3’-dA突出末端平端化。
- 置换反应合成标记的DNA探针(3)。
- 寡核苷酸介导的位点特异性突变(4)。
- 连接非依赖型克隆PCR产物(5, 6)。
酶活性分析混合物：67 mM Tris-HCl (pH 8.8), 6.7 mM MgCl2 , 1 mM DTT, 16.7 mM (NH4 )2 SO4 , 0.2 mg/ml BSA, 0.033 mM各种dNTP, 0.4 MBq/ml [3 H]-dTTP, 0.2 mM热变性和核酸酶处理的牛胸腺DNA。
20 mM磷酸钾 (pH 7.5), 200 mM KCl, 2 mM DTT和50% (v/v)甘油。
- 抑制剂：金属螯合剂、核苷酸类似物2(p-n-butylanilino)-dATP、N2-(p-n-butylphenyl)-dGTP)、SH-封闭混合物 (7)。
- 失活：75°C加热10分钟。
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文献和实验Using T4 DNA Polymerase to Generate Clonable PCR Products
Polymerase chain reaction (PCR) mediated through Taq DNA polymerase has become a simple and routine method for cloning, sequencing, and analyzing genetic information from very small amounts of materials (1 ). Taq DNA polymerase
Ligation of DNA with T4 DNA Ligase
recombination and DNA synthesis. DNA ligase from E. coli is a polypeptide with a molecular weight of 74,000 and is NAD-dependent. T4 DNA ligase is the product of gene 30 of the T4 phage, has a molecular weight of 68,000, and is ATP-dependent. Both enzymes
相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
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