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大量
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上海羽朵
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20次
主要用途
纯化线粒体蛋白质浓度定量测定试剂是一种旨在通过化学裂解处理,获得可溶性线粒体总蛋白,然后使用考马斯亮蓝染色剂G-250与可溶性蛋白质特异性结合产生色彩差异变化,通过比色测定其最大吸收转换来定量线粒体蛋白质浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种纯化线粒体(动物、人体、植物、昆虫等)的蛋白质浓度测定。用于后续蛋白一维或二维电泳、西方杂交、酶活测定等等。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。
技术背景
线粒体是细胞中重要的细胞器,其主要功能是提供细胞内各种物质代谢所需要的能量。线粒体中含有丰富的细胞色素氧化酶系统和细胞凋亡相关蛋白等。通过特殊裂解液,最大限度获得可溶性线粒体蛋白质。考马斯亮蓝染料G-250(Coomassie Brilliant Blue G-250)是一种与蛋白质结合的化学染料。它的三苯甲烷(triphenylmethane)基团,主要与蛋白质的非极性结构结合。而它的阴离子磺酸盐(anion sulfonate)基团与蛋白质分子的阳离子和芳香类氨基酸,尤其是精氨酸和赖氨酸侧链的结合。在酸性环境下,其最大吸收波长从465nm转换为595nm。Bradford提出的方法的最大优点在于不受样品中各种化学成分的干扰。
产品内容
裂解液(Reagent A) 毫升
反应液(Reagent B) 毫升
标准液(Reagent C) 微升
补充液(Reagent D) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存标准液(Reagent C)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里,反应液(Reagent B),避免光照;有效保证3月
用户自备
动物细胞/组织线粒体粗提分离试剂盒(YD10006.1):用于获得线粒体成分
1.5毫升离心管:用于样品操作的容器
(微型)台式离心机:用于沉淀不溶性物质
涡旋震荡仪:用于混匀
96孔板或比色皿:用于样品比色的容器
分光光度仪或酶标仪:用于比色分析
详细实验步骤请咨询客服!
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文献和实验糖凝胶上检测分析。如图一所示 图一:2.2 超声破碎后,8000g,30秒,4°C,离心。将上清移入新的管子中。开始准备进行染色质免疫共沉淀(IP)。2.3 每份超声样品取50ul,这时的样品标记为INPUT,用于定量DNA浓度和作为PCR的空白对照。超声后的染色质应立刻冻入液氮中或者储存于-70°C可储存2个月。避免多次反复冻融。3检测DNA浓度1INPUT样品用于为后来的IP样品计算DNA浓度。DNA可采用PCR纯化试剂盒(加入70ul洗脱液,接着进入3.2a)或者采用酚/氯仿抽提(加入350ul
; ②Qubit 准确度更高:蛋白质、游离核苷酸、EDTA 等物质在 260nm 处也存在吸收峰,从而影响紫外分光光度计定量的准确度,而荧光染料仅与目标核酸特异性结合,不受其他杂质影响,qubit 成为精准定量的 「金标准」; ③Qubit 检测范围更精准:紫外分光光度计检测范围较宽(通常 ng/μL-μg/μL),但低浓度( ④紫外分光光度计操作更简单,成本更低:紫外分光光度计可以直接点样进行定量,无需专业试剂;而 Qubit 法需经加染料、孵育等步骤,再用仪器检测,依赖于专门的染料,仪器价格更贵
992)样本:人 HeLa 细胞 (Fig.6)A. 5% 脱脂奶粉封闭,一抗浓度:1.0 mg/mL,溶于 5% 脱脂奶粉和 0.15 M NaClB. 5% 脱脂奶粉封闭,一抗浓度:1.0 mg/mL,溶于 5% 脱脂奶粉和 0.5 M NaClFig.6我们为您推荐实验设计数据参考:裂解缓冲液蛋白定位裂解液推荐试剂盒全细胞NP-40 or RIPA全蛋白抽提试剂盒细胞质(可溶蛋白)Tris-HCl胞浆蛋白和核蛋白抽提试剂盒线粒体蛋白提取试剂盒细胞质(细胞骨架 等不溶蛋白)Tris










