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- YDJ168
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
参考说明书
- 保质期：
参考说明书
- 英文名：
参考说明书
- 库存：
大量
- 供应商：
上海羽朵
- 规格：
20次
主要用途
完全线粒体内膜功能（膜电位）荧光测定试剂是一种旨在通过高度敏感的阳离子荧光羰花青染料结合到线粒体基质，其荧光的增强或减弱说明线粒体膜电位的变化，即内膜电负性的增高或降低，来分析线粒体内膜功能的完整性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种纯化线粒体制备物和活体细胞线粒体的功能检测。可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老等的研究。产品严格无菌，即到即用，活体检测，操作极为简易，性能稳定。
技术背景
阳离子荧光羰花青染色剂JC-1（5,5',6,6'-tetrachloro-1,1',3,3'-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine iodide）是一种对膜电位高度敏感的染色剂。它特异性地进入线粒体，分布和结合在线粒体基质上。线粒体膜电位的高低变化决定了JC-1的分布浓度。电位高，JC-1形成聚集体，而浓度高，荧光显色为红色或桔红色；反之，则为绿色。荧光减弱表明线粒体内膜功能受到损害。
产品内容
保存液（Reagent A） 毫升
染色液A（Reagent B） 微升
染色液B（Reagent C） 微升
稀释液（Reagent D） 毫升
清理液（Reagent E） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存 清理液（Reagent E）在4℃冰箱里，其余的保存在－20℃冰箱里； 染色液A（Reagent B）和 染色液B（Reagent C）避免光照；有效保证12月
用户自备
胰蛋白酶乙二an四乙酸混合液（ YD12024）：用于细胞脱离
DMEM完全细胞培养液（ YD12052）：用于细胞脱落收集
1.5毫升离心管：用于染色的容器
（微型）台式离心机：用于样品操作
培养箱：用于染色孵育
比色皿或96孔板：用于荧光定量分析的容器
（共聚焦）荧光显微镜：用于线粒体荧光定性分析
荧光分光光度仪或荧光酶标仪：用于荧光定量分析
细胞流式仪：用于线粒体荧光分析
详细实验步骤请咨询客服！！！
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文献和实验以下检测方法：1、线粒体功能2、DNA Cycle3、Caspases4、Annexin V Assay5、DNA Fragmentation Assays基本上涵盖了细胞凋亡的各个期，对各种检测方法的原理和特点做一个简单介绍。线粒体功能检测的试剂盒有深圳达科为公司代理的试剂盒（产品编号为BVK250）和BD公司出售的盒Apo-Alert试剂盒。其检测主要采用阳离子型荧光染料。原理是：正常细胞中，染料可以在线粒体内聚集，发出明亮的红色荧光；而细胞凋亡后，其线粒体膜电位发生改变，染料无法进入线粒体，只能
性起调节作用。很多凋亡的关键步骤包括caspase激活物的释放和电离子通道的改变，以及线粒体膜电位差的丢失等都发生于线粒体，因此线粒体 对凋亡的发生或抑制起重要作用。 (一)细胞色素C释放与凋亡复合体的形成 在研究哺乳细胞凋亡的生物化学反应时，发现某些位于线粒体内膜的蛋白可以直接启动细胞凋亡，并导致细胞色素C释放到细胞质或细胞核。被释放的细胞色素C可以和Apaf―1结合，改变其构象，大大增加后者与dATP／ATP的亲和性，并且使细胞色素C―Apaf―1形成多聚体。与此
rhodamine methyl ester(TMRM)等可结合到线粒体基质，其荧光的增强或减弱说明线粒体内膜电负性的增高或降低。 方法：将正常培养的细胞和诱导凋亡的细胞加入使用终浓度为Rhodamine 123（1mM）或终浓度为DiOC6（25nM），JC-1（1mM），TMRM（100nM），37℃平衡30min，流式细胞计检测细胞的荧光强度。 注意事项 1、始终保持平衡染液中pH值的一致性，因为pH值的变化将影响膜电位。 2、与染料达到平衡的细胞悬液中如果含有蛋白，他们将与部分染料结合，降低染料
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