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- 2025年07月13日
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产品说明书（中文版）
主要用途
通用型线粒体DNA损伤（8-hydroxydeoxyguanosine）比色法定量检测试剂是一种旨在使用单克隆抗8-羟基脱氧鸟苷抗体竞争性结合样品中的8-羟基脱氧鸟苷，进而使用辣根过氧化酶缀合二抗，由生色染料四甲基lianben胺参与反应，呈现黄色产物，即通过比色法定量评价线粒体样品DNA损伤水平的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。主要适用于各种小鼠、大鼠、人体细胞或组织线粒体裂解样品8-羟基脱氧鸟苷的定量分析。广泛用于细胞衰老、细胞凋亡、肿瘤等的研究。产品即到即用，反应敏感，操作简捷，性能稳定，显色清晰。
技术背景
核酸氧化损伤（nucleotide oxidative damage），包括DNA和RNA损伤，是由于环境因子或细胞代谢影响，在逃避细胞防御机制的前提下，所产生的四种损伤之一：氧化、烷化（alkylation）、水解和碱基错配损伤等。而氧化损伤主要通过活性氧族（reactive oxygen species；ROS），包括超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO-）等的作用，使碱基羟基化和嘌呤环裂开，诱导鸟嘌呤（guanine；G）向胸腺嘧啶（thymine；T）的颠换（transversion），造成体细胞基因突变，影响细胞周期、基因转录、细胞凋亡等，最终导致各种疾病的发生，例如糖尿病、高血压、中风、癌症、衰老等。其中核酸损伤产物8-羟基脱氧鸟苷（8-hydroxy-2’-deoxyguanosine；8-OHdG）作为DNA损伤的分子标志；8-羟基鸟苷（8-hydroxyguanosine）作为RNA损伤的分子标志。8-羟基脱氧鸟苷是最常见的DNA损伤产物，也是氧化应急的生物标志。基于单克隆抗8-羟基脱氧鸟苷抗体竞争性结合样品中的8-羟基脱氧鸟苷，进而使用辣根过氧化酶缀合二抗，由生色染料四甲基lianben胺（3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine；TMB）参与反应，呈现黄色产物，在分光光度仪下（450nm波长），定量检测8-羟基脱氧鸟苷的含量。
产品内容
标记液（Reagent A） XX微升
酶促液（Reagent B） XX毫升
清理液（Reagent C） XX毫升
底物液A（Reagent D） XX毫升
底物液B（Reagent E） XX毫升
终止液（Reagent F） XX毫升
标准液（Reagent G） XX微升
抗体酶标板 XX列
产品说明书 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里；暂时不用，保存在－20℃冰箱里；底物液B（Reagent E）易挥发，密闭瓶盖，避免光照；抗体酶标板，密封干燥保存；有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管：用于工作液配制
培养箱：用于反应孵育
酶标仪：用于比色分析
详细实验步骤请咨询客服！
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文献和实验细胞凋亡的检测方法众多，流式细胞仪检测凋亡，是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此，具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下，首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体，线粒体的功能发生衰退；后是caspase家族激活，磷脂酰丝氨酸外翻，这时细胞的形态已经发生了改变，可以看到细胞变小，胞核皱缩；最后是细胞内DNA断裂，形成凋亡小体。在凋亡发生的各个过程当中，都有相应的流式细胞仪的检测方法，可以采用
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皮层和海马升高。说明脑中致炎细胞因子表达的升高可能与P8衰老相关的神经功能紊乱或认知功能缺陷有关。 ⑵ 基因表达的变化 Tobita等采用原位缺口平移法研究了3、6、9和12月龄P8海马区的DNA单链损伤状况，3和6月龄鼠DNA链损伤不明显，与对照组相似；而9、12月龄鼠DNA损伤加重，并伴增龄累加。海马这种伴增龄的损伤很可能与学习和记忆的缺陷有关，而自由基是造成这种DNA损伤的主要损伤原因之一。 为进一步分析衰老对氧化应激基因表达的影响，Kumar等采用了低密度膜芯片研究了4月龄和12月龄P8
取出所需分装管，并在规定时间内使用完毕，避免整管长时间暴露于室温。 4. 机械解离法 vs 酶解法 vs 组合法？ 解离方法各有优缺点，根据不同组织类型和需求选择合适的解离方式。 （1）机械解离法：通过剪切、研磨、吹打等物理力破坏细胞间连接，无需酶试剂无需孵育时间成本较低，但是容易造成细胞损伤（如碎片多活率低）和解离不完全（如致密组织），常用于快速解离脾脏等柔软组织。 （2）酶解法：利用蛋白酶（胶原酶、胰酶、木瓜蛋白酶等）降解细胞外基质，温和解离保护细胞膜完整性，但是易破坏表位，且需要挑选合适
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