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外泌体分离和鉴定

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  • 外泌体(exosomes)分离和鉴定
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  • 2026年02月04日
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      晶莱生物

    • 服务名称

      外泌体(exosomes)分离和鉴定

    • 规格

      样本

    外泌体
    外泌体是多泡体限制性膜与细胞质膜融合而释放的脂质双层膜囊泡,直径约30~200 nm,电子显微镜下呈双凹碟形或杯状,外泌体能够运载其内源性的蛋白质、脂质、核酸、miRNA等信息物质参与细胞间通讯和机体的生理代谢过程,被认为是细胞间通讯、疾病诊断和预后循环生物标志物的重要载体,在临床诊断和治疗方面展现出了极具前景的研究价值。外泌体通过其携带的蛋白质、核酸、脂类等来调节受体细胞的生物学活性,从而参与机体免疫应答、抗原提呈、细胞迁移、细胞分化、肿瘤侵袭等生物学过程。
     
    外泌体的负富集分离
    外泌体在大小、来源和分子内容物方面均存在高度异质性,因此富集分离外泌体是开展其基础研究和临床转化应用的前提。传统经典的富集分离外泌体的方法有:超速离心、密度梯度离心、共沉淀等技术手段。

     
    产品细节图片1
     

    外泌体鉴定

    WB/ELISA检测膜蛋白:CD9、CD63、CD81,Alix, TSG101, annexins, Rabs等

    透射电镜:形态学鉴定, 双层囊膜结构是外泌体重要标志之一。

    Nanosight粒径密度分布分析:外泌体特征粒径大多数处于100nm左右。
     

    产品细节图片2
     

    外泌体显微成像. a) SEM;b) TEM; c) cryo-EM; d) AFM
    from Shao, H., et al. 2018. Chem Rev.


    产品细节图片3
    WB和ELISA鉴定外泌体蛋白. a) WB; b)  ELISA
    from Shao, H., et al. 2018. Chem Rev.
     
    需确认的信息
    1. 样本类型及种属
    2. 样本数量
    3. 需鉴定方式(WB、ELISA、TEM)
     
    晶莱生物服务流程
    产品细节图片4



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    • 速看!脑组织分离外泌体终于出炉!

      101 和 Calnexin。WB 结果如下: 图三 WB 鉴定脑组织外泌体蛋白 marker 从 WB 结果可以看出,CD9 和 TSG101 在外泌体样本中呈现阳性结果,Calnexin 在外泌体样本中呈现阴性结果。符合外泌体的蛋白特征。 从以上三种常用的外泌体鉴定结果中可得出,本次使用的从小鼠脑组织中分离外泌体的方法是可行的,能顺利获得需要的外泌体。但是方法中也存在一些不足,从电镜结果中可以看出,样本中可能还有一些杂质掺杂。 如果要进一步除杂,可能就要面临损失很多外泌体的风险,所以经常遇到的问题

    • 肿瘤组织如何提取分离外泌体

      分析(NTA)和 WB marker 鉴定。 二、TEM 鉴定外泌体形态: 将提取的外泌体样本置于冰盒中,使用移液枪吸取外泌体样本于铜网上静置 1 min。(用镊子夹铜网要轻,防止铜网夹破)。再将铜网上的外泌体样本吸干,使用移液枪吸取醋酸双氧铀染色液室温染色。随后将染色完成的样本放于灯下烤。样本制好后,观察拍照,保存图片。结果如下: 图一 TEM 鉴定外泌体的形态 从 TEM 结果中可以看出,从肿瘤组织中分离得到的外泌体具有典型的杯托状结构,且数量比较多。 三

    • 外泌体分子的分离与检测指导

      本部分介绍了外泌体分离的 4 种具体方法与外泌体鉴定的 3 种具体途径,并包含了外泌体组学分析、外泌体示踪及功能等知识点的讲解。

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