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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
上海经科化学科技有限公司
- 服务名称:
COIP 免疫共沉淀实验服务
- 规格:
膜
COIP 免疫共沉淀实验服务说明
一、技术原理与服务用途
二、IP 与 COIP 实验区分说明
- IP 免疫沉淀
- 实验目的:已知单一靶蛋白,富集未知互作蛋白,借助质谱完成未知蛋白鉴定,用于挖掘全新蛋白互作关系
- 后续检测:沉淀产物考染后依据差异条带质谱鉴定,或直接取沉淀洗脱液质谱检测
- Input 检测:需设置
- 抗体要求:1 支 IP 级别抗体
- 实验周期:6 个工作日
- 交付成果:原始图片、input 检测图、考染胶图、实验报告、考染凝胶或蛋白洗脱液
- 样本上限:单指标最多 8 个样本
- COIP 免疫共沉淀
- 实验目的:验证已知多种蛋白间的互作关系
- 后续检测:沉淀完成后开展 WB 检测
- Input 检测:需设置
- 抗体要求:沉淀用抗体为 IP 级别,WB 检测抗体为普通 WB 级别,两类抗体需为不同种属来源
- 实验周期:7 个工作日
- 交付成果:原始图片、input 检测图、WB 条带图、完整实验报告、灰度定量分析数据
- 样本范围:单组可处理 1-6 个样本(不含 IgG 对照与 input 样本)
三、COIP 标准实验流程
四、送样与抗体规范
- 样本要求
- 新鲜组织:重量 100mg 以上
- 细胞样本:细胞总量 10^7 以上,细胞沉淀体积≥50μL
- 运输条件:所有样本干冰运输
- 抗体要求:沉淀用抗体为 IP 级别,IP 抗体与 WB 检测抗体不可为同种属来源
五、交付实验成果
- 小鼠肝脏样本正向 A 拉 B 检测图谱,包含 IP:A、IP:IgG 分组、对照组、实验组、input 及内参 GAPDH 条带;
- 小鼠肝脏样本反向 B 拉 A 检测图谱,包含 IP:B、IP:IgG 分组、对照组、实验组、input 及内参 GAPDH 条带。
六、配套相关实验服务
七、使用范围
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文献和实验最近 WB 的结果趋势不是很理想,因为给了蛋白 B 的抑制剂蛋白 B 却没有明显变化。于是大伙儿一合计,可能需要再看看蛋白质之间的相互作用,会不会是抑制剂影响了蛋白 B 和蛋白 C 之间的结合,而不是直接导致蛋白 B 的降解。大家都知道研究蛋白质相互作用的三大经典方法是:酵母双杂交(Y2 H),免疫共沉淀(CoIP)和 GST pulldown。结合我们课题组的这个实验,因为只需看看蛋白 B 和 C 之间的结合,而且已知蛋白 B 和 C 是会结合的,所以可能用 CoIP 最简便。那么问题
原理 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是利用抗原和抗体的特异性结合以及 Protein A 或 G 特异性地结合到抗体的Fc 片段的现象探测两个蛋白分子间是否存在相互作用的一种方法。在细胞裂解液中加入针对蛋白M的抗体,孵育后再加入Protein A 或 G 预处理的 Sepharose 珠,若细胞中有与蛋白M结合的蛋白 N,就可以形成这样一种复合物:“蛋白 N-蛋白M—抗蛋白 M 抗体—Protein A 或 G—Sepharose 珠”,经 SDS
-ChIP™染色质免疫共沉淀实验检测流程(Upstste Catalog # 17-371)1、Kit Description:试剂盒内含的RNA聚合酶II阳性对照抗体2、试剂盒组分: A. Provided Kit Components Store at 4℃: ChIP Blocked Protein G Agarose 1.5 ml ChIP Dilution Buffer, One vial
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










