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菲优特
- 服务名称:
免疫共沉淀技术实验服务
- 规格:
项
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。
其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads上,使之与含有抗原的溶液及抗体反应后,beads上的prorein A就能吸附抗原达到精制的目的。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。
服务流程
1.样本总蛋白提取及与特定抗体反应
2.用Protein A/G捕获特定的抗体-蛋白复合物
3.洗涤去掉未被捕获的蛋白,得到纯蛋白抗体复合物
4.通过Western-Blot检测IP结果
5.数据处理及Figure制作
客户提供
1.目的蛋白信息(Protein A、Protein B)
2.需检测的细胞样品(Protein A、Protein B均可表达,可不需阳性样)
3.适用于IP的一抗(Protein A)及其说明书
4.适用于Western Blot的一抗(Protein B)及其说明书
我们提供
1.原始数据、结果图片
2.标准实验报告
3.SCI标准Result Figure
检测周期7-30个工作日(特殊项目除外)
检测流程
1)电话咨询
2)工程师报价
3)邮寄样品或上门取样
4)支付检测费用,开展实验
5)完成实验,出具检测报告
6)邮寄检测报告,售后服务

菲优特检测服务形式
·委托检测:环境检测、化工检测、水产养殖检测、微生物检测、毒理测试、药品检测、食品/医药/保健品检测等
·科研服务:分子生物学、代谢组学、蛋白质组学、基因组学、细胞服务、细菌服务、新药研发筛选模型构建、疾病动物模型构建、组织切片服务及其他开放类服务项目
·方法开发及咨询:实验室检测方法开发和应用、实验室管理咨询和培训、质量控制咨询与培训、实验仪器配置和选型等
·仪器共享:色谱分析、质谱分析、光谱分析、电镜分析、核磁测试、热谱测试等
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文献和实验背景:真核生物的基因组DNA以染色质的形式存在,研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用是阐明真核生物基因表达机制的基本途径。与传统的EMSA技术相比,染色质免疫沉淀技术(CHIP)能真实完整地反映结合在DNA序列上的调控蛋白,是目前研究体内DNA与蛋白质相互作用的最佳方法。原理:是在活细胞状态下以甲醛固定蛋白质-DNA复合物,超声将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后加入目的蛋白抗体,通过抗体沉淀靶蛋白-DNA复合物,通过洗脱的方法得到富集的靶蛋白-DNA复合物,特异性地富集目的
免疫共沉淀技术 当细胞 在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的蛋白质―蛋白质间的结合被保持下来,因此可用于检测和确定生理条件下相关的蛋白质―蛋白质相互作用。如果实验目的是检测两种特定蛋白质是否在体内存在相互作用,第二种蛋白质通常用免疫印迹方法检测;如果实验目的是发现新的结合蛋白,可以直接对胶上蛋白质进行染色来确定。其实验步骤如下。 (1)用磷酸盐缓冲液洗30块10 cm培养板上的适宜细胞。刮去每块板上的细胞到1ml冰冷的EBC裂解缓冲液中。
准备工作: 预冷PBS,RIPA Buffer,细胞刮子(用保鲜膜包好后,埋冰下),离心机 1. 用预冷的PBS洗涤细胞两次,最后一次吸干PBS; 2. 加入预冷的RIPA Buffer(1ml/107个细胞、10cm培养皿或150cm2培养瓶,0.5ml/5×106个细胞、6cm培养皿、75cm2培养瓶) 3. 用预冷的细胞刮子将细胞从培养皿或培养瓶上刮下,把悬液转到
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