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- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
上海经科化学科技有限公司
- 服务名称:
稳转株 WB 水平验证实验服务
- 规格:
次
稳转株 WB 水平验证实验服务说明
一、服务背景与应用
二、完整实验流程
三、交付内容
- A549 阴性对照组、沉默组 GOLPH3/MIDAS 蛋白条带结果;
- HCT116 阴性对照组、过表达组 Rad51 蛋白条带结果。
四、配套相关实验品类
- 3000bp 以内、3000bp 以上过表达慢病毒包装
- 3000bp 以内、3000bp 以上沉默慢病毒包装
- 不同片段长度过表达稳转株构建
- 不同片段长度沉默稳转株构建
五、使用范围
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文献和实验过表达稳转株验证时,一个高频纠结: 过表达稳转株验证,做 qPCR 就够了吗?还是要做 Western Blot?两者结论不一致怎么办? 先说结论: 建议两个都做。qPCR 证明目的基因在 mRNA 水平整合表达,WB 证明蛋白真的表达出来了——而功能是蛋白执行的。只做 qPCR 的过表达验证,在投稿时几乎必然被要求补充蛋白水平证据。 验证顺序建议: qPCR 确认 mRNA → WB 确认蛋白 →(可选)流式/荧光确认阳性比例 → 功能实验 --- 一、qPCR 和 WB 各自回答
当抗体验证图也开始被质疑:做 WB 的人,真正需要守住的是第一张原图
内容摘要: 商业抗体验证图像出现大规模争议,并不等于相关抗体都已被证实无效。对真正做 Western Blot(WB)的人来说,更现实的问题是:当一次实验失败时,手里的记录能否帮助自己判断,问题出在抗体、样品、转膜、曝光,还是后处理?本文提供一份新抗体预验证与原图留存清单,并说明 Touch Imager 与数据钢印如何在图像采集和数据追溯环节提供支持。 事实边界: 本文依据截至 2026 年 8 月 27 日可查的公开资料撰写。文中提及的调查数据库属于持续更新的线索记录,其中被标记的图像不能
这是稳转株验证的核心,按类型区分: 稳转株类型 验证方法 合格标准 过表达(OE) qPCR + Western Blot mRNA 显著上调,蛋白水平明确上调(带 Flag 标签可用抗 Flag 检测) 敲低(KD) qPCR(+WB) mRNA 敲低通常 ≥70%;蛋白功能研究必须加 WB 敲除(KO) PCR 扩增靶位点 + Sanger 测序(+WB) 基因型为移码/纯合(100% 纯合子交付是高标准);蛋白消失或显著缺失 敲入(KI
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










