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免疫共沉淀coip多少钱
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免疫共沉淀coip多少钱
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation, Co-IP)是一种广泛应用于dànbáizhì相互作用研究的经典技术,其核心原理是利用特异性抗体捕获靶蛋白及其互作复合物。关于免疫共沉淀coip多少钱,具体费用需要根据实验需求和样品情况来确定,影响因素包括抗体选择、样本复杂度、检测方法以及是否外包服务等。例如,实验室自行开展Co-IP实验的成本主要取决于抗体的价格(单克隆抗体通常在几百至数千元不等)、磁珠或琼脂糖珠的消耗(约每毫克数百元),以及后续Western blot或质谱分析的附加费用。若委托zhuānyè机构完成,免疫共沉淀coip多少钱会根据样本数量和分析深度浮动,单个样本的基础服务费可能在2000-5000元区间,而高通量或定量质谱检测则会显著增加预算。
从技术层面看,免疫共沉淀coip多少钱的差异主要源于实验设计的严谨性。高质量的Co-IP需优化抗体特异性(避免交叉反应)、裂解缓冲液配方(如RIPA或NP-40对膜蛋白的提取效率不同),以及对照实验的设置(如IgG同型对照或敲除细胞系阴性对照)。例如,研究弱相互作用时可能需要更昂贵的交联剂(如DSP)或温和洗涤条件,这些都会影响免疫共沉淀coip多少钱的zuì终核算。此外,后续验证步骤(如银染、荧光标记或质谱鉴定)的选择也会显著改变总成本。
在学术应用中,免疫共沉淀coip多少钱的合理性需与数据可靠性权衡。低效抗体可能导致假阴性,而过度洗涤会丢失瞬态相互作用,这些操作失误反而会提高重复实验的隐性成本。近年来,基于标签(如FLAG、HA)的亲和纯化与Co-IP联用技术逐渐普及,虽然标签抗体的使用可能增加免疫共沉淀coip多少钱,但能显著提高特异性,尤其适用于内源抗体效果不佳的靶蛋白。
常见问题:
Q1. 如何通过实验设计降低免疫共沉淀coip多少钱而不牺牲数据质量?
A:优先验证商用抗体的免疫沉淀效率,通过预实验确定zuì低有效抗体浓度;采用可重复使用的Protein A/G磁珠替代传统琼脂糖珠;结合SDS-PAGE考马斯亮蓝初筛替代全部Western blot,减少检测步骤成本。
Q2. 内源性与过表达系统进行Co-IP时,免疫共沉淀coip多少钱的差异主要来自哪些环节?
A:内源性Co-IP需要更高亲和力抗体(通常价格昂贵),且样本量需求更大(如10^7细胞/次);过表达系统可通过标签抗体降低成本,但需额外支付质粒构建与转染费用。膜蛋白的Co-IP还需添加去垢剂优化步骤,进一步影响预算。
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文献和实验最近 WB 的结果趋势不是很理想,因为给了蛋白 B 的抑制剂蛋白 B 却没有明显变化。于是大伙儿一合计,可能需要再看看蛋白质之间的相互作用,会不会是抑制剂影响了蛋白 B 和蛋白 C 之间的结合,而不是直接导致蛋白 B 的降解。大家都知道研究蛋白质相互作用的三大经典方法是:酵母双杂交(Y2 H),免疫共沉淀(CoIP)和 GST pulldown。结合我们课题组的这个实验,因为只需看看蛋白 B 和 C 之间的结合,而且已知蛋白 B 和 C 是会结合的,所以可能用 CoIP 最简便。那么问题
tyw5668 请问是不是免疫组化、免疫荧光、Elisa?谢谢 lianhongli 应该是酵母双杂、免疫共沉淀和共定位吧。 gingivalis 不管答案是什么,千万不要以为这就是权威。 方法是无限的。不怕做不到,就怕想不到。 summityoung 1.酵母双杂交是初筛 2.筛到得蛋白要用Co-IP、GST
相关专题 免疫沉淀(IP)是一种利用的抗原 抗体反应的原则,确定具体反应中混合物的抗体蛋白数量及具体物理特性的方法。而免疫共沉淀(Co-IP) 则作为分析蛋白质间的相互作用而被广泛认知。下面是这两种实验方法的具体操作步骤。 Steps of IP: 1. Form the antigen-antibody complex (immune complex) by incubating specific antibody
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