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- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
云舟生物科技(广州)股份有限公司
- 服务名称:
定制服务
云舟生物专注于高度复杂的CRISPR文库设计,以满足各种大规模和小规模功能筛选的实验需求。CRISPR文库可以以E. coli菌株、质粒DNA或重组病毒的形式交付。我们使用下一代测序(NGS)全面验证定制文库,能让您真正了解所购买文库的组分和质量。
亮点
- 高多样性: 我们的CRISPR文库拥有从数百至106的高度复杂度。
- CRISPR文库设计经验丰富: 我们对于多种类型的CRISPR文库针对不同种类的筛选策略拥有丰富的设计经验,包括但不限于CRISPR KO(单gRNA或双gRNA)、CRISPRa、CRISPRi、单细胞CRISPR技术、CRISPR barcoding技术等。
- 高度灵活的载体设计: 我们可根据您的需求为您设计合适的文库载体,使用不同的递送系统、启动子、标记基因、barcode等。
- 高质量病毒包装: 我们可包装多种病毒系统,周期短、性价比高
- 高覆盖率、高均一性: 我们设计的载体变体其文库可达>98%的覆盖率
技术详情
CRISPR 筛选策略
CRISPR文库是一种强大的工具,可用于针对特定通路、疾病、细胞对药物治疗的反应、发育过程、基因调控等编码或非编码区域的大规模或全基因组功能筛选。表3展示了常用的CRISPR筛选方法并进行了比较。
表3 CRISPR筛选方法比较

实验数据
图1 云舟生物CRISPR文库的复杂度、覆盖率和序列比对的一致性。来自于云舟生物构建的CRISPR文库的数据以无偏好方式进行收集和分析。(A)文库复杂度范围从102到>105。(B)gRNA的覆盖率和读取的比对率均很高,表明我们的文库具有出色的覆盖率和低错误率。
图2 包含7.7×104个gRNA的文库的gRNA分布统计。gRNA read counts使用NGS库大小(一千万reads)进行标准化,并以log2尺度绘制。NGS测序深度为300×。
客户提供文库质粒
如果您需要使用您的文库质粒构建文库,请按照外来物品接收指南将质粒寄送给我们。请严格按照我们的指南来进行装运以免造成物品的任何延误和损坏。客户提供的所有材料均需经过QC检测,每一份材料附加检测费用。请注意,客户提供物品接收并通过QC之后生产才正式开始。对于使用客户文库质粒构建的文库,我们无法保证文库的多样性和均一性。
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文献和实验篇相关文献相继发表发表 (图 A),这项技术如同病毒一般广泛又迅速的传播到世界各地,并且随着时间推移,这项技术也出现了许多革新与优化。 CRISPR 序列的生物学功能依然不够明确 1987 年,科学家们首次在大肠杆菌中发现了 CRISPR 基因,并且随后在 40% 的细菌中和 90% 的古细菌体内发现了类似序列。2005 年,CRISPR 序列与抗噬菌体的免疫作用联系起来。整个 CRISPR-Cas9 获得性免疫系统通路大致分为三个步骤:获得 CRISPR 序列-产生
CRISPR 基因编辑技术自问世以来,就有着其他基因编辑技术无可比拟的优势,其应用在医学科研领域后,也不断的取得喜人的成果,进而迅速风靡于世界各地的实验室。那么 CRISPR 技术如此受到科研界的青睐,到底有什么过人之处呢?本文则揭开 CRISPR 神秘的面纱,让你快速掌握该基因编辑热门技术的精髓所在。CRISPR 原理及基本结构CRISPR/Cas 系统作为原核生物的免疫系统,可识别外源性遗传物质 DNA,并将其切断,沉默外源基因的表达。在该系统中,CRISPR 序列是由众多短而保守的重复
gRNA 设计是整个 CRISPR 实验里性价比最高的一步——花一小时把序列挑对,能省下后面四周的返工。但也有个误区:很多人把设计理解成"打开网站、输基因名、复制第一条序列"。 先说结论:gRNA 设计的核心是选对靶外显子和切割位置,而不是单纯看软件打出的脱靶分数。一条高分 gRNA 如果切在最后一个外显子、或者切在只有部分转录本共有的外显子上,编辑效率再高也拿不到真正的敲除。设计流程应该是:确定编辑目的 → 选择靶区域 → 生成候选序列 → 过滤序列层面的禁忌 → 评估脱靶 → 至少保留
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