cliniVec™

云舟生物的cliniVec™项目旨在帮助研究人员完成从科研阶段到临床前开发的平稳过渡。一个成功的无缝过渡流程需要详细考虑多种关键因素，如细胞和基因治疗药产品的功效、安全性和可制造性。云舟生物的cliniVec™设计团队专注于优化针对临床前和临床研究的载体设计。

如果您需要获得针对您的项目独特的个性化设计支持，请联系我们的cliniVec™设计团队，该团队致力于为您提供高度复杂的临床前载体设计指导。研究人员必须在临床前阶段的早期就开始优化他们的载体设计，这将有助于节省开发时间并推动符合成本效益的临床前研究。

载体设计对于载体效用的重要性

载体设计是细胞和基因治疗药物效果的关键因素，而优化载体设计则是一个需要仔细考察多方因素的过程。每一个载体元件的序列都必须经过深思熟虑的设计和实验测试以发挥良好的功能。其中，启动子改造可显著影响基因表达水平发。通过仔细操控这一个区域可以提高载体的效用。此外，通过优化编码序列，也可以促进治疗性基因被正确翻译，增加其有效表达。对于细胞和基因疗法开发，其它需要采取的策略性措施还包括优化GC含量和CpG岛，更好地应对隐性剪接位点和过早的polyA信号等挑战性问题，并确保mRNA/IDR三级结构经过优化达到很低的水平。总而言之，这些措施有助于载体的高效翻译、改善其治疗效果，同时体现了载体设计和优化过程的复杂性。

除了载体序列本身外，载体组件的排列对于顺利地实现载体功能以及最大限度地降低意外相互作用的的发生至关重要。 此外，选择适当的载体系统，优化包膜蛋白或衣壳以靶向特定组织，进行高效的基因递送，也是获得成功的临床结果的关键。 cliniVec™设计团队从每年数千个载体设计中汲取了丰富的经验，可提供用于改进临床前和临床研究载体设计的全面指导。

图1 启动子序列对基因治疗载体效用的影响。图中展示了接受重组AAV9基因替代疗法的小鼠生存率。实验比较了使用不同的启动子序列驱动表达的治疗性基因药效。实验还同时观察了野生型对照和未接受治疗的突变型小鼠。

 

临床前载体设计的安全性考量

安全性对于细胞和基因治疗载体的在临床环境中的成功应用至关重要。药物开发人员必须考虑各种涉及安全性的因素，包括抗生素选择、含有病毒来源的调控元件以及载体成分的毒性和免疫原性。

在临床前载体中选择抗生素筛选标记是一个特别重要的决策，因为许多常用的抗生素不符合临床法规。 因此，建议从临床前阶段开始使用卡那霉素。此外，相比于ORF，常用的WPRE调控元件也具有安全性问题。对此可选择WPRE3或WPRE突变体这样的替代序列。

 

临床前载体的可制造性

基因治疗载体的可制造性涉及多种因素，包括需要确保上游和下游过程的可扩展性、产量和质量的可重现性以及法律合规性。 通过考量载体骨架、宿主菌优化和发酵条件测试，可提高载体生产的质量和产量。 通过优化临床前载体的特定产量和体积产量，可分别带来更高质量的DNA和更具成本效益的载体生产。

 

图2 通过宿主菌优化和骨架优化提升产量。载体克隆使用了不同的骨架，在实验室规模下进行发酵测定特定产量（柱）和体积产量（点）。

序列筛选项目

云舟生物的cliniVec™设计团队与体内体外筛选服务专家密切合作，可为您筛选应用于基因治疗的各种载体序列。我们提供多种类型的筛选项目，除了载体衣壳序列筛选，还包括启动子和编码序列筛选等。我们提供从文库构建到NGS测序和验证的端到端筛选服务。与我们的cliniVec™设计团队合作，获得为您量身定制的高精度且可靠的序列筛选解决方案，提高载体开发的成功率。

图3 采用衣壳进化筛选方法后的新型AAV衣壳。AAV转导小鼠颈椎，对比衣壳优化前的传统血清型AAV与优化后的新型衣壳AAV的转基因（CMV>EGFP）递送效率。