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- 利用嵌合抗原受体 (Chimeric antigen receptor，CAR) 载体生产可识别肿瘤相关抗原的工程T细胞（也称为CAR-T细胞）已成为一种极富前景的癌症治疗工具。
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- 2026年10月18日
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云舟生物科技（广州）股份有限公司
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定制服务
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CAR受体的结构由四个主要部分组成：
（1）一个胞外抗原识别结构域，由已知特异性的抗体的单链可变区片段 (Single chain variable fragment，scFv) 组成。 scFv促进抗原结合，包含一个轻链可变区片段和一个特异的单克隆抗体的重链片段，两者通过一个柔性的肽链相连；
（2）一个位于胞外的铰链区或间隔区，将scFv与CAR的跨膜结构域连接起来，并为CAR的结构提供灵活性和稳定性；
（3）跨膜结构域，将CAR锚定在质膜上，从而将胞外的铰链区和抗原结合结构域同细胞内结构域关联起来。它在增强受体表达和稳定性方面起着关键作用；
（4）胞内信号域，通常源自T细胞受体的CD3 zeta链并包含免疫受体酪氨酸激活基序（Immunoreceptor tyrosine-based activation motif，ITAM)。抗原结合CAR后，ITAM被磷酸化并激活下游信号传导，从而导致T细胞的后续活化。此外，该胞内结构域还可以引入一个或多个与CD3 zeta信号域串联的共刺激域（来源于CD28、CD137等），以改善T细胞增殖效率和活化的持久性。
我们的CAR表达质粒载体非常适合非病毒的第二代CAR表达盒转染T细胞。整个CAR 表达盒包括scFv区、铰链区、跨膜结构域和胞内CD3 zeta信号域以及共刺激域，均位于用户选择的启动子下游。用常规质粒载体转染的一个关键优势是它是瞬时转染的，只有非常少的质粒会稳定整合到细胞基因组中（通常小于1%）。
优势
技术简单：对比病毒转导，CAR表达质粒载体通过电转染法转染T细胞是一种较为简单的技术。病毒载体的病毒包装过程耗时且技术上具有相当挑战性。
安全性：CAR表达质粒载体转染至细胞后为瞬时表达，不整合细胞基因组，因此对比逆转录病毒类的载体不会产生显著的插入突变风险。
大装载量：我们的载体大小可达30 kb，而载体骨架只占有3 kb，因此留有相当多的空间用于CAR表达盒的设计，比如加入启动子、标记基因以及额外的目的基因等。
低成本：生产临床级别的质粒载体比病毒载体可以减少相当多的成本，使用CAR表达质粒载体制备用于临床研究的CAR T细胞具有很高的性价比。由于CAR T细胞的临床效果根据临床前的小鼠上的实验效果进行预测，因此在临床研究中也需要使用CAR T细胞进行研究。
云舟生物可提供的CAR载体有：
- 慢病毒载体
- MMLV逆转录病毒载体
- MSCV逆转录病毒载体
- PiggyBac转座载体
- Sleeping Beauty转座载体
- Tol2转座载体
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from pluripotent stem cells. Cell Rep. 2023 Mar 28;42(3):112241. doi: 10.1016/j.celrep.2023.112241. 7. Wen P, Ai Q, Fan X, et al. Programmable Smart CAR-T design: A new paradigm in precision immunotherapy driven by logic gates, conditional activation, allogeneic
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