七肽库筛选|噬菌体展示肽库|多肽库构建

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  • 卡梅德生物科技(天津)有限公司作为国家高新技术企业,专注于为全球科学家和研究机构提供天然蛋白提取与发酵、重组蛋白定制表达服务,单、多克隆抗体开发,噬菌体文库构建与筛选服务;同时,基于我公司成熟的五大核心技术服务平台,成功研发了众多用于科学研究的重组蛋白、抗体、抗体药物靶点蛋白、工业酶、诊断原料等相关试剂。
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  • 2025年12月08日
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      卡梅德生物科技(天津)有限公司

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      随机七肽库筛选

       卡梅德生物提供的噬菌体展示平台是一个超高通量配体筛选平台,噬菌体展示平台可以构建高达1013/ml的肽或在噬菌体上展示的抗体克隆。经过随后几轮的生物筛选,卡梅德生物可以提供多达105个经过验证的肽或抗体序列,为后续酶底物、蛋白质配体和高特异性抗体的搜索提供了坚实的研究基础。基于噬菌体展示平台,K卡梅德生物可以为客户构建7肽库、12肽库和环7肽库等。

       随机7肽库的应用:

        肿瘤靶向治疗在临床试验中是治疗恶性肿瘤的有效方法。噬菌体展示是一种分子多样性技术,允许在丝状噬菌体表面呈现大量肽或蛋白质,用于各种应用。该研究报告了使用噬菌体展示来产生与癌症组织结合的肽库。为了实现这一点,他们开发了一种筛选方案,其中包括对结肠癌细胞(SW480)进行3轮体外阳性筛选,以及用噬菌体展示-7肽库对正常人肠上皮细胞进行2轮体外消减筛选。经过几轮淘洗,噬菌体滴度和回收效率都显著提高。通过基于细胞的酶联免疫吸附测定、免疫荧光、体内结合测定、免疫细胞化学染色和免疫组织化学染色,肽CP15(VHLGYAT)被证明是靶向肿瘤细胞(SW480和HT29细胞)和肿瘤组织的最有效肽,而不是靶向正常人肠上皮细胞和对照结肠组织的肽。这些研究表明,肽CP15可能是开发有用的结肠肿瘤诊断和靶向药物递送剂的有前途的主要候选者。

    提供7噬菌体展示肽文库的构建:

        通过化学合成合成7聚体肽的随机寡核苷酸片段,然后将其插入噬菌体载体的外壳蛋白编码基因中,并通过基因工程重组技术转化到大肠杆菌中。将随机7聚体肽与M13噬菌体小外壳蛋白(pIII)融合以形成组合文库。所示的7聚体肽在pIII的N末端表达,即成熟蛋白的第一个氨基酸是无规7聚体的第一个核酸,并且7聚体之后是由Gly-Gly-Gly Ser组成的短链间隔多肽,然后是野生型pII蛋白。增殖和产生的噬菌体表面携带外源肽,每个噬菌体表面表达一种外源肽。所有这些噬菌体构成了一个预制的随机7肽库。

       客户提供的靶分子用于从整个预制的噬菌体随机7肽库中经过筛选、扩增和选择步骤,获得能够与靶分子高亲和力结合的噬菌体克隆。通过测定该噬菌体的DNA序列,可以知道噬菌体携带的肽的氨基酸序列。

    噬菌体展示肽库筛选:

       噬菌体展示描述了一种选择技术,其中肽或蛋白质变体库在噬菌体病毒粒子的外部表达,而编码每个变体的遗传物质存在于内部。这在每个变体蛋白质序列和编码它的DNA之间建立了物理联系,这允许通过称为筛选的体外选择过程,基于对给定目标分子(抗体、酶、细胞表面受体等)的结合亲和力进行快速划分。在最简单的形式中,通过在涂有靶标的板(或珠)上孵育噬菌体展示肽库,洗去未结合的噬菌体,并洗脱特异性结合的噬菌体来进行筛选。然后对洗脱的噬菌体进行扩增,并通过额外的结合/扩增循环来富集有利于结合序列的库。3-4轮后,通过DNA测序和结合测定对单个克隆进行表征。
     
    服务优势:

    --为您的免疫学、蛋白质组学和医学发现研究提供一站式解决方案。
    --卡梅德生物构建的用于高通量生产的预制噬菌体展示肽库。
    --准确快速的实验过程,为客户节省时间。
    --专业技术专家,准确控制筛选过程。
    --在没有免疫原性问题的情况下筛选大量不同的克隆。
    --特异性高,灵敏度高。
    --广泛应用于肽类药物的开发和抗原决定簇的准确定位。
    --可溶性抗原的快速生产能力:结合我们现有的重组蛋白表达系统,我们可以生产高纯度和高生物活性的可溶性抗原,以支持免疫或筛选靶分子。


     

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