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- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称:
噬菌体多肽库构建
- 提供商:
北京孚博
- 规格:
次
北京孚博生物推出噬菌体多肽库构建服务,将化学合成的随机寡核苷酸序列与噬菌体的表面蛋白基因融合,在噬菌体表面表达出各种氨基酸组合的随机序列短肽。利用噬菌体展示随机肽库可以高通量筛选各种抗原的抗原表位。
筛选过程
将展示文库作为可溶相,而将与欲选择的重组基因产物有特异性亲和力的靶分子固定在一个固相载体上,洗去不能与固定相特异结合的文库的大部分成员,将特异结合的成员洗脱下来,再进一步扩增,进入下一轮淘选。
采用噬菌体
溶源性的单链丝状噬菌体(如M13、f1和fd)
优势
- 自动化进行噬菌体展示高通量筛选,实现快速交付
- 采用亲和力检测技术,选择最佳的框架区序列快速且高通量筛选高亲和力及实现高产量
- 大于90%以上的片段插入率
服务内容
| 服务名称 | 服务内容 |
| 多肽库构建 | 7肽、12肽等肽库构建、筛选、测序、分析 |
孚博生物追求专业化发展道路,始终秉持“质量第一,客户至上,开拓创新求发展”的运营方针,用我们的专业化服务为 您创造更高的价值。
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文献和实验野生型噬菌体λDNA全长约50kb,上有65种限制酶酶切点,除ApaⅠ、NaeⅠ、NarⅠ、NheⅠ、Sna BⅠ、XbaⅠ和XhoⅠ等7种限制酶各有一个切点外,其余都多于2个。有些酶切点在λ增殖所必需的基因区域内。因此,噬菌体λ必须经过改造才能用作载体。现在用的λ载体大都除去了某种限制酶的酶切点。因此,作为载体的噬菌体λ都短于野生型。 噬菌体λ载体有两种类型:①插入型。由于改建后的噬菌体λDNA都短于野生型,所以可插入外源DNA。只要插入的位置不影响噬菌体增殖
噬菌体肽库到构建方法 利用噬菌体 展示技术建立随机肽库的方法是:通过化学合成的方法,随机合成特定长度肽的寡核苷酸片段,然后通过基因工程重组技术插入至噬菌体载体的外壳蛋白编码基因中并转化大肠杆菌,增殖和产生的噬菌体其表面携带有外源多肽,每个噬菌体表面表达一种外源肽,所有这些噬菌体构成随机肽库。利用目标分子从整个噬菌体随机肽库中经筛选一扩增一筛选等步骤,最后获得能与靶分子高亲和力结合的噬菌体克隆。通过测定该噬菌体的DNA序列后,就可知道噬菌体所携带的多肽氨基酸序列。
我欲先构建某一个病毒的cDNA文库(construction of the cDNA phage-display library ),再用噬菌体展示技术来筛与某一受体蛋白对应的病毒表面的配体蛋白。 我想问的是: 1、我应该选择哪种噬菌体作为载体(优点?) 2、文库的构建至关重要,有没有好的专门先用来构建cDNA文库,再做噬菌体展示的试剂盒(厂家、价格?) 3、有没有相关的书、文献推荐 4、该技术的难点和注意点? New england biolabs有现成的盒子买,附件里有其中一







