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- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
北京安必奇生物
- 服务名称:
激酶稳定细胞系构建服务
激酶(Kinase)通过调节底物的磷酸化状态以响应外界刺激,在细胞的信号传导及其复杂的生命活动中起到了广泛的作用,异常的激酶活动会触发不适当的信号传导从而引发多种疾病,尤其是癌症。由于其重要的生物学功能,小分子激酶抑制剂在临床试验中发挥了重要作用,激酶和突变型激酶(Mutant Kinase)已成为各种癌症药物研发的重要靶点。

Ba/F3,小鼠原B细胞系,其在体外的生长和增殖依赖于培养基中IL-3的维持。如果引入某种特定的激酶基因,可以使Ba/F3不再依赖IL-3进行增殖。引入的激酶作为Ba/F3增殖的驱动基因,可以用于评估小分子药物对特定激酶的靶向抑制作用。
安必奇有多年的稳定细胞系构建经验,可以为客户提供高品质的激酶细胞系构建服务,以助力于激酶抑制剂的筛选和药效学研究。
应用领域
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激酶抑制剂的筛选
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药效学研究
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细胞增殖分析
我们的优势
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拥有成熟的稳定细胞系构建平台和很棒的技术团队
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灵活的细胞系构建策略:脂质体转染法、电穿孔法和病毒转导法
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严格的质量控制体系:细胞系无真菌、细菌和支原体污染
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在激酶研究领域有多年的经验
服务流程

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文献和实验-Pool KOUT 文库:全基因组敲除筛选。稳定株构建若涉及靶点可行性预判,可先用文库筛选或池化验证快速确认该基因是否为必需基因。 CRISPR-Pool SAM 文库:激活筛选文库,用于功能获得性研究;若筛选方向为激活而非敲除,宿主细胞需另行构建。 稳定细胞株构建服务 稳定株构建中工作量最大、最容易失败的是单克隆筛选环节。服务价值主要体现在: 并行处理大量克隆,缩短整体周期; 针对不同细胞系的克隆形成优化经验(条件培养基、分选方案); 池化效率预验证,避免在低效靶点上浪费时间; 交付经 NGS
相关专题 1.G418的配制 : 方案一: 300mgG418加入3ml PBS 溶液,浓度为100mg/ml,完全溶解后,0.22um 过滤,-20℃保存。 方案二:(1)配制1M HEPES:23.8g HEPES(缓冲能力更强)粉末溶于100ml ddH2O,10N NaOH(加量较多)调节pH至7.3,过滤除菌 (较难过滤),4℃保存,终浓度为1mol/L。 (2)5g
想长期表达某个基因,但它一高表达细胞就死、一过表达表型全是"中毒"——这时候很多老师会想到诱导表达系统: Tet 诱导稳定细胞株(Tet-On)怎么构建?和普通稳转株差在哪?诱导倍数怎么验证? 先说结论: Tet 诱导稳转株的核心是把"表达开关"装进稳转系统:细胞先稳定表达调控蛋白(Tet-On 的 rtTA),再引入由 TRE 应答元件控制的目的基因。平时不表达或低表达,加入诱导剂(多西环素 doxycycline)后才按剂量诱导表达。构建框架仍是"感染 → 筛选 → 验证 → 冻存
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