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- 详细信息
- 用户评价
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃避光保存6个月。
- 保质期：
6个月
- 英文名：
ECL luminescence reagent,ECL发光液,HRP化学发光底物
- 库存：
现货
- 供应商：
爱必信(上海)生物科技有限公司
- 规格：
2*250mL/2*50mL/2*25mL
| 规格： | 2*250mL | 产品价格： | ￥1155.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 2*50mL | 产品价格： | ￥368.0 |
| 规格： | 2*25mL | 产品价格： | ￥210.0 |
| 描述 | Western blot底物发光检测试剂可由标记于二抗上的辣根过氧化酶催化，产生化学发光反应，可以灵敏地检测出目的蛋白的存在。ECL底物化学发光检测试剂盒基于新一代增强型化学发光底物研制而成，并对成份做了优化。产品背景低，稳定性好。它由辣根过氧化物酶(HRP)催化发生化学反应，发出荧光，可对X光胶片曝光，也可直接进行luminometer检测或者荧光CCD扫描。 |
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| 产品组分 | A液；B液 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 技术指标 |
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| 操作步骤 | 1、按常规Western blot操作，二抗孵育后，进行最后一次洗涤时，根据膜的大小，按每10 cm2 膜混合0.5ml溶液A和0.5ml溶液B混匀，配制成发光检测工作液。 2、用平头镊子将膜取出，膜的下缘轻轻接触吸水纸，以去除膜上多余的液体。膜的蛋白面朝上，置于洁净保鲜膜（某些市售保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光，应选择高质量保鲜膜）上。用吸管将配制的发光检测液转移到蛋白膜上，使其均匀覆盖，室温孵育2分钟。 3、用平头镊夹持蛋白膜，膜的下缘轻轻接触吸水纸，以去除膜上多余的液体。膜的蛋白面朝上，包裹于洁净保鲜膜内。轻轻赶出其间的气泡，固定在X片暗盒内。 4、在暗室中取一张X片置于包裹的膜上，合上暗盒，曝光30秒至1分钟。立即显影定影，根据其曝光强度，缩短或延长下一张X片的曝光时间（对微弱信号，曝光时间可延长至数小时）。 |
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| 操作说明 | 1、ECL A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头，A液和B液相互污染后会导致 A液或B液逐渐失效，影响后续的使用效果。 2、各溶液使用后，请盖紧瓶盖，以防失效。特别是B液，含有氧化剂，比较容易 被还原而失效。 3、ECL的荧光持续时间很长，但开始反应后的30分钟内荧光更强一些，随后荧光会逐渐减弱，因此请注意充分利用这荧光较强的30分钟进行压片。 4、ECL A液和B液均对人体有害，操作时请注意适当防护。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
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| 基本信息 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 别名 | ECL发光液,HRP化学发光底物 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 储存/保存方法 | 2-8℃避光保存6个月。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
实验结果图：
Western blot analysis of Rock-1 expression in Hep G2 (A) and NIH/3T3 (B) whole cell lysates.
Western blot analysis of NFATc3 isoform expression in Ramos whole cell lysate.
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[7]Overexpression of RAB34 associates with tumor aggressiveness and immune infiltration in glioma
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[9]Differential Expression of α-Enolase in Clinical Gastric Tissues and Cultured Normal/Cancer Cells in Response to Helicobacter pylori Infection and cagA Transfection
[10]Autologous Bioactive Compound Concentrated Growth Factor Ameliorates Fistula Healing of Anal Fistula in a Pig Model and Promotes Proliferation and Migration of Human Skin Fibroblasts via Regulating the MEK/ERK Pathway
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Ecl 显色原理：鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物，也可用作过氧化物酶的底物。在Ecl底物中，含有H2O2和鲁米诺，在HRP（辣根过氧化物酶）的作用下，发出荧光来。 试验步骤： 1）将两种显色底物1：1等体积混合（一般各1ml/membrane）。 2）将混合物覆盖在膜表面，1-2分钟，摇晃使均匀。 3）用保鲜膜把膜包起来，放入夹板中。 4）在暗室中将X光片，覆盖在膜的上面，夹好夹子，曝光1min。 5）显影、定影。 6）根据结果调整曝光时间和曝光区域，得到
蛋白质免疫印迹（Western Blot ）-底物化学发光 ECL 法
蛋白质免疫印迹（Western Blot ）可以：（1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；（2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；（3）用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA 相互作用后续分析。实验方法原理———底物化学发光 ECL 法Western 免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。与 Southern 或 Northern 杂交
过夜具体多长时间算合适，其实没有硬性规定； 二抗孵育的时间不宜过长，一般是室温下摇床孵育 1~2 小时，抗体孵育完成后要清洗干净，特别是二抗孵育完成后，否则可能导致显影结果出现高背景。 6、发光液配置 大部分实验室使用的 ECL 发光液，A 液和 B 液按照 1：1 的比例配置； 发光液要求现用现配，每次根据使用量合理配置用液量； 发光液配置时间过长同样会引起发光效果不好，背景脏或者漆黑一片。
