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肽质量指纹图谱分析
- 提供商：
北京蛋白质组研究中心生物质谱实验室
实验室网址：http://bprc-ms.dxy.cn
详情请登录：http://tong.dxy.cn/biomsbprc/index.htm
肽质量指纹图谱分析
实验设计：MALDI-TOF MS/MS质谱鉴定 技术简介： 肽指纹图谱(Peptide Mass Fingerprinting, PMF)测定是对蛋白酶解或降解后所得多肽混合物进行质谱分析的方法。质谱分析所得肽断与多肽蛋白数据库中蛋白质的理论肽断进行比较，判断出所测蛋白是已知还是未知。由于不同的蛋白质具有不同的氨基酸序列，不同蛋白质所得肽断具有指纹特征。采用肽指纹谱的方法已对多种蛋白质组进行了研究。
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文献和实验一. 实验目的1. 掌握DNA指纹图谱技术的概念、原理和基本操作过程2. 学习DNA的限制性酶切的基本技术3. 掌握琼脂糖凝胶电泳的基本操作技术，学习利用琼脂糖凝胶电泳测定DNA片段的长度，并能对实验结果进行分析。二. 实验原理1984年英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合作者首次将分离的人源小卫星DNA用作基因探针，同人体核DNA的酶切片段杂交，获得了由多个位点上的等位基因组成的长度不等的杂交带图纹，这种图纹极少有两个人完全相同，故称为"DNA指纹"，意思是它同人的指纹一样是每个
DNA指纹图谱分析[DNA Fingerprinting ](图)
一.实验目的 1.掌握DNA指纹图谱技术的概念、原理和基本操作过程2.学习DNA的限制性酶切的基本技术3.掌握琼脂糖凝胶电泳的基本操作技术，学习利用琼脂糖凝胶电泳测定DNA片段的长度，并能对实验结果进行分析。二.实验原理1984 年英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合作者首次将分离的人源小卫星DNA 用作基因探针，同人体核DNA 的酶切片段杂交，获得了由多个位点上的等位基因组 成的长度不等的杂交带图纹，这种图纹极少有两个人完全相同，故称为"DNA指纹"，意思是它同人的指纹一样是每个
甲基酮（TPCK ) 进行了处理从而避免非特异性胰蛋白酶的活性。 c. 在分子质量 600~4000 Da 中，由于氨基酸 K 和 R 的存在，通过胰蛋白酶作用，产生了大部分的蛋白酶水解肽段，这和高分子质量精确的 MALDI-TOF-MS 兼容。 d. 商业猪胰蛋白酶赖氨酸侧链进行了甲基化还原处理，这样可减少自切肽段，但是在 842.5099 Th 和 2211.1046 Th 的两个信号强的离子峰能用于质谱内的校正平衡。 e. 蛋白酶水解肽段很容易就能质子化（并且在质谱分析中产生很好的信号
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