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简单多肽、蛋白及生物工程制品分析

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      北京欧米科斯生物科技有限公司

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      简单多肽、蛋白及生物工程制品药物理化分析

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    简单多肽、蛋白及生物工程制品分析
    蛋白质组的研究是从整体水平上研究细胞或有机体内蛋白质的组成及其活动规律。质谱技术作为蛋白质组研究的三大支撑技术之一，除了用于多肽，蛋白质的分子量测定外，还广泛的应用于肽指纹图谱测定及氨基酸序列测定。在蛋白质组的研究中，蛋白质和多肽的序列分析已不局限于阐明蛋白质的一级结构，对翻译后的修饰的进一步分析也是蛋白质化学的一项重要任务。这种修饰对于蛋白质的功能非常重要。如：细胞识别中的蛋白质相互作用，信号传导和蛋白质定位。
    北京欧米科斯生物科技有限公司是专门从事蛋白质组学和多肽生物药的企业，拥有国际先进的实验设备和成熟完善的实验技术，承接为蛋白质及多肽（药物）提供质量控制、理化性质检测等方面的分析测试服务。作为生物工程制品的蛋白质/多肽产品的检测一般包括结构鉴定和确证、物化性质分析等检测内容。如：由于蛋白质可能会出现的固有程度的结构异质性，目标产品可能是预期的翻译后修饰的各种形式的混合体(糖蛋白)，这种与预期结构不同的其他形式可能会对产品的安全性和有效性产生影响；生物工程制品在生产和/或贮存过程中也可能产生异质性，异质性与产品的质量密切相关，因此需要应鉴定其纯度以确保批与批之间的一致性，等等。
    技术咨询电话：13071173939
    针对大批量质谱分析或签订长期技术服务合同的客户实行特别优惠
    并能够在短时间内得到检测结果
    技术服务项目
    1. 生物活性蛋白质/多肽分子量测定及氨基酸分析
    实验设计：HPLC液相色谱、MALDI-TOF MS/MS质谱鉴定、LTQ-FT MS/MS质谱鉴定、
    数据检索
    技术简介：
    对肽序列的测定往往要应用串连质谱技术，采用不同的技术选择特定质核比的离子，并对其进行碰撞诱导解离，通过分析肽段的断裂情况推导出肽序列。
    应用高效液相色谱（离子交换、反相、分子筛等）结合蛋白鉴定技术，分离纯化并鉴定复杂体系中具有生物活性的蛋白或多肽。
    Ø 多种高效液相色谱系统可支持在短时间内对蛋白质或多肽进行分离和纯化
    Ø 多种高灵敏度、高准确度的质谱设备，可快速给出未知蛋白质或多肽的质谱信息
    Ø 强大的蛋白质搜库系统可快速搜索并鉴定不同种属、不同来源的蛋白质或多肽
    2. 蛋白质纯度检测
    实验设计：HPLC液相色谱
    技术简介：
    应用高效液相色谱，根据具体蛋白的性质确定分离条件得出样品纯度检测结果。
    Ø 离子交换、反相、分子筛等多种高效液相色谱系统可支持对蛋白质或多肽进行分离和纯化
    Ø 通过调节流动相浓度梯度确保得到较好的分离效果
    3. 肽质量指纹图谱分析
    实验设计：MALDI-TOF MS/MS质谱鉴定
    技术简介：
    Ø 肽指纹图谱(Peptide Mass Fingerprinting, PMF)测定是对蛋白酶解或降解后所得多肽混合物进行质谱分析的方法。质谱分析所得肽断与多肽蛋白数据库中蛋白质的理论肽断进行比较，判断出所测蛋白是已知还是未知。由于不同的蛋白质具有不同的氨基酸序列，不同蛋白质所得肽断具有指纹特征。采用肽指纹谱的方法已对多种蛋白质组进行了研究。
    4. 蛋白质等电点测定
    实验设计：IEF等点聚焦电泳、胶条染色
    技术简介：
    等电点是蛋白质的重要理化性质之一，有PH3-10线形和非线性、PH4-7、PH6-9等多种PH范围的胶条可供选择，以期得到较好的测试结果。
    5. 蛋白质/多肽N-糖基化位点分析
    实验设计：样本处理、糖苷酶去除N-糖链、O18标记糖基化位点、质谱分析、数据检索
    技术简介：
    糖蛋白在细胞内部，细胞膜和细胞外均有发现，实际上大部分蛋白质是糖蛋白。对糖蛋白的检测和分析发现，糖蛋白中糖组分的结构和功能具有多样性。糖基化的多样性与细胞周期，细胞分化和发展的状态有关。在蛋白组时代中，蛋白质的修饰会引起其理化性质的改变，因此是不容忽视的。目前，人们主要研究糖肽，其好处之一就是质量小，这就会得到更好的分辨率，而且糖肽仍保留了糖基化位点。将分离的糖蛋白用不同的蛋白酶消化后就可进行糖肽的研究。一旦糖肽被识别出，就可以用串连质谱(ESI-MS/MS)来阐明肽序列。
    糖基化作用是一种最常见也非常重要的翻译后修饰作用。一种大规模鉴定N端糖基化蛋白的方法——糖肽位点特异性同位素标记（isotopecoded glycosylationsitespecific tagging）,使用凝集素亲和捕获蛋白质混合物中经胰蛋白酶消化后的糖肽，然后以18O标记N端糖基化的肽，18O 标记的肽之后通过多维LC-MS技术进行鉴定。由于这种方法使用于大量糖蛋白的系统化鉴定，它将极大促进糖生物学的研究，并有利于诊断学方法的进步，如对与疾病相关的糖蛋白的大规模基因组扫描。
    6. 蛋白质/多肽磷酸化位点分析
    实验设计：质谱分析、数据检索、磷酸化位点确定
    技术简介：
    蛋白质磷酸化作用是重要的翻译后修饰作用之一。磷酸化通常发生在丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸的侧链，在组氨酸、谷氨酸侧链也有发生。选择性分离磷酸化肽结合LC-MS/MS，特异修饰抗体、酶促反应结合定量蛋白质组学技术鉴定丝氨酸和苏氨酸位点上不同的修饰，将从全蛋白分离得到的高频率自由氨基酸基团进行稳定同位素标记，适用于任何蛋白样品，包括从组织或体液中获得的抽提物，同时也适于目前蛋白质组学研究中的分离方法。此法在定量蛋白质组时具有高精确度和可重复性，并有很高的序列覆盖率。

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