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双荧光素酶报告基因
- 提供商:
西安淳风生物科技有限公司
- 规格:
一组
双荧光素酶报告基因
▼服务简介
荧光素酶(Luciferase)生物检测技术诞生于1990年,距今已有30多年的发展史。单荧光素酶检测系统到双荧光素酶检测系统的发展,为科研人员提供了更为严谨的实验手段。双荧光素酶报告基因检测系统在原有的基础上引入了海肾报告基因,可以排除不同组之间细胞生长状况、细胞数目以及转染效率带来的干扰,起到校正的作用,从而使实验结果更为可靠。
▼应用场景
荧光素酶作为一种理想的报告基因,主要可用于miRNA与靶基因的靶向互作研究、转录因子与启动子调控机制研究、启动子活性研究等。
▼实验原理
荧光素酶报告基因检测是以荧光素为底物来检测萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase,简称F-Luc)活性的一种报告系统。早年间的单荧光素酶检测系统由于其只有萤火虫荧光素酶,实验结果往往会受到各种实验条件的影响,目前已基本没人使用。之后的双荧光素酶报告基因检测系统在原有基础上引入了由固定组成型启动子驱动的以腔肠素(coelenterazine)为底物的海肾报告基因(Renilla luciferase,简称R-Luc)作为内参基因,可排除不同组之间细胞生长状况、细胞数目以及转染效率带来的干扰,起到校正的作用,从而使实验结果更为可靠。计算结果时,将萤火虫荧光素酶的检测值除以海肾荧光素酶检测值即可。
▼服务内容

▼案例展示

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文献和实验在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时 ,通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因(比如CAT,β-Gal,GUS)不够便利。因为各自的测试化学,处理要求,检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术,结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因测试系统,结合pRL载体系统,表达第二个报告基因海洋腔肠荧光素酶,在单管中进行双荧光素酶报告基因测试,快速,灵敏,简便。系统还提供PLB裂解液,用来裂解在多孔板中培养的哺乳细胞,不需操作单个样品
【求助】请教一个关于双荧光素酶报告基因检测系统中共转染两种报告基因质粒的比例的问题?
lsdcfhyj 用双荧光素酶报告基因检测系统进行报告基因检测时需要共转染两种荧光素酶报告基因质粒,但是我不知道两种质粒间的比例是多少,有哪位前辈做过这方面实验的,请帮我指点一下,谢谢了 xxshc 这个比例没有特别的规定。我用的pRL-TK(海蜃素荧光素酶)的荧光值要高一些,我转20ng/孔(24孔板),作为内参.pGL3(萤火虫荧光素酶)的荧光值低一些,我转0.4ug/孔(24孔板)然后0.4ug的调整质粒。这样的话,萤火虫荧光素酶
1、双荧光素酶实验原理; 2、验证转录因子与启动子互作; 3、验证miRNA与mRNA互作
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