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- 2026年01月16日
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舒桐生物科技
- 服务名称：
CRISPRa 预制稳转株、预制稳定细胞系
- 规格：
/套
预制稳定细胞系
舒桐医疗科技有限公司基于慢病毒，PB转座子，TALEN和CRISPR等技术，制备了一批高质量的稳定细胞株，涵括多种常用细胞系，可表达多种常用因子，如CRISPR-Cas9核酸内切酶、GFP荧光蛋白、荧光素酶、细胞骨架相关蛋白等，可作为理想的常用科研工具便于广大科研工作者的研究和药厂药物筛选开发。
CRISPRa 预制稳转株
催化失活的Cas9（dCas9）连上转录激活子，可以有效促进基因组特定位点的转录，这一工具被称为CRISPRa。CRISPRa预制稳转株为dCas9-VP64/MPH基因稳定表达的单克隆细胞株。这些细胞株稳定表达C端融合人密码子优化的dCas9的转录激活子VP64，同时也稳定表达激活辅助蛋白复合物MPH(MS2-p65-HSF1)。使用时只需简单地将启动子靶向的sgRNA或CRISPRasgRNA文库导入CRISPRa细胞系，是研究基因表达激活和基因筛选的理想工具。
CRISPRa 预制稳转株应用
（1）可以在不增加目的基因拷贝数的情况下，通过转录激活机制高效地过表达目的基因；（2）非常适合长链非编码RNA的功能机制研究；
（3）sgRNA文库的耐药性分析（激活某药物研究通路）；
（4）细胞通路研究。
舒桐CRISPRa预制稳转株
| 产品名称 | 说明 |
|---|---|
| HEK293-SpdCas9-KRAB-puro-GFP | 慢病毒稳转的SpdCas9-KRAB细胞系 |
| HeLa-SpdCas9-KRAB-puro-GFP | 慢病毒稳转的SpdCas9-KRAB细胞系 |
| SiHa-SpdCas9-KRAB-puro-GFP | 慢病毒稳转的SpdCas9-KRAB细胞系 |
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文献和实验毒载体。 2.慢病毒包装与纯化 慢病毒包装采用三质粒或四质粒系统进行包装，收集细胞培养上清，通过超速离心浓缩纯化和收集病毒。 3.慢病毒滴度检测 检测方法：定量PCR检测干扰后细胞基因组中外源DNA拷贝数 实验原理：慢病毒介导外源基因以逆转录方式整合进目的细胞基因组 4.慢病毒载体优势 ① 表达时间长：慢病毒可将外源基因整合到宿主细胞基因组上，实现基因长时间稳定的表达，不随细胞分裂传代而丢失，是细胞实验的首选，常用于构建稳转株 ② 安全性高：未发现致病性，慢病毒载体改造T细胞用于CAR-T
Cell Rep：梁洪青 / 刘琬璐 / 张丹等团队揭秘 ERV 不同亚家族在人类早期胚胎中的特异性调控机制和功能
7 分别被激活。该研究通过筛选，鉴定了 KLFs 家族的 KLF4/KLF5 可以特异性激活基因组中的 LTR7Y 拷贝，但并不能激活 LTR7 相关拷贝。该研究进一步对 naïve hESCs 进行了单细胞测序，从单细胞水平分析了 KLFs 家族与多能性相关的 TEs 之间的相关性。结果表明，与其他 KLFs-TEs 相比，KLF4/KLF5 与 LTR7Y 的相关性最高，而与 LTR7 的相关性较弱。 随后，该研究利用 KLF4/KLF5 敲除细胞系的 RNA-seq 技术发现，naïve hESCs
就是HEK293细胞系)。更高的转染效率是更高的病毒滴度的基本保障。 ViraPackTM 转染 试剂盒经Stratagene非常著名的MBS哺乳动物转染试剂盒改进而来，使用起来更为方便，推荐用于AdEasy® XL腺病毒载体系统，AAV(腺相关病毒)-无辅毒系统以及ViraPortTM反转录病毒系统，也可用于慢病毒载体。 ViraPackTM 病毒转染 试剂盒：货号#200488 试剂盒提供：2.5 M CaCl2, Solution，2x BBS (pH
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