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- 提供商:
舒桐生物科技
- 服务名称:
CRISPRa 预制稳转株、预制稳定细胞系
- 规格:
/套
预制稳定细胞系
舒桐医疗科技有限公司基于慢病毒,PB转座子,TALEN和CRISPR等技术,制备了一批高质量的稳定细胞株,涵括多种常用细胞系,可表达多种常用因子,如CRISPR-Cas9核酸内切酶、GFP荧光蛋白、荧光素酶、细胞骨架相关蛋白等,可作为理想的常用科研工具便于广大科研工作者的研究和药厂药物筛选开发。
CRISPRa 预制稳转株
催化失活的Cas9(dCas9)连上转录激活子,可以有效促进基因组特定位点的转录,这一工具被称为CRISPRa。CRISPRa预制稳转株为dCas9-VP64/MPH基因稳定表达的单克隆细胞株。这些细胞株稳定表达C端融合人密码子优化的dCas9的转录激活子VP64,同时也稳定表达激活辅助蛋白复合物MPH(MS2-p65-HSF1)。使用时只需简单地将启动子靶向的sgRNA或CRISPRasgRNA文库导入CRISPRa细胞系,是研究基因表达激活和基因筛选的理想工具。
CRISPRa 预制稳转株应用
(1)可以在不增加目的基因拷贝数的情况下,通过转录激活机制高效地过表达目的基因;(2)非常适合长链非编码RNA的功能机制研究;
(3)sgRNA文库的耐药性分析(激活某药物研究通路);
(4)细胞通路研究。
舒桐CRISPRa预制稳转株
| 产品名称 | 说明 |
|---|---|
| HEK293-SpdCas9-KRAB-puro-GFP | 慢病毒稳转的SpdCas9-KRAB细胞系 |
| HeLa-SpdCas9-KRAB-puro-GFP | 慢病毒稳转的SpdCas9-KRAB细胞系 |
| SiHa-SpdCas9-KRAB-puro-GFP | 慢病毒稳转的SpdCas9-KRAB细胞系 |
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文献和实验依赖于其完整序列和定位,cDNA 过表达常常无法重现其天然功能。 5. 需要做 rescue 实验、回补被敲除的基因 用过表达质粒(且要对 cDNA 做同义突变以抵抗原有的 gRNA)。CRISPRa 无法用于已敲除基因的回补——基因组位点已经被破坏了。 --- 四、吉凯基因CRISPR相关产品与服务 CRISPR/Cas9慢病毒产品 提供 sgRNA 与 Cas9 慢病毒包装。CRISPRa 项目中,dCas9 融合蛋白与 modified sgRNA 通常需要慢病毒稳定递送,病毒滴度和表达稳定
准备构建稳定细胞株的老师,最常问的第一个问题往往是: 稳转株到底要多久才能拿到手?会不会拖慢整个课题进度? 先说结论: 混合克隆稳转株通常约3~4周;单克隆稳转株通常需要6~8周甚至更长;CRISPR KO/KI 编辑类稳转株周期更长,KO 定制约5周起、KI 定制约10周起;如果目标细胞恰好有现货稳转株,最快2周左右就能交付。 规划实验时可以按这个顺序倒推时间: 下游实验时间 → 细胞需要验证+复苏适应的时间 → 单克隆 or 混合克隆 → 构建周期 --- 一、慢病毒稳转株的标准时间线
;CRISPR 路线要过 sgRNA 活性验证、单克隆规模、基因型确认这几关。这些环节自建的试错成本很高,也是专业平台和普通实验室差距最大的地方。 吉凯基因这几条路线都已经做成了标准产品线: 慢病毒稳转株(OE、RNAi)默认包含病毒产品,支持混合克隆和单克隆交付,还有"工具+细胞学"的一站式模式,病毒和细胞在一个体系里解决,不用自己对齐两套参数。CRISPR 稳转株方面,KO 细胞株有 500+ 现货(KO、OE、RNAi),快至 2 周交付;KO 定制快至 5 周、KI 定制快至 10 周,支持移码
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