丁香通
丁香园
论坛
医药招聘
丁香医生
更多
调查派
用药助手
丁香搜索
医药数据库
来问医生
我要登录
|
免费注册
|
我的丁香通
企业机构:
成为企业机构
个人用户:
个人中心
移动端
搜实验
大家都在搜
大家都在搜
0 人通过求购买到了急需的产品
免费发布求购
搜索
发布求购
实验专区
实验库(10000+)
实验问答
实验专题
热门视频
前沿资讯
科研者之家
丁香通
>
实验专区
>
实验问答
>
全部
实验问答
28,888,839 科研人在看
我要提问
全部
细胞
免疫
蛋白质
PCR
DNA
RNA
微生物
动物
遗传
生物信息
其他
问
肺癌 A549 为什么细胞不贴壁了?
SHINING579
除了以上说的,还可能是培养瓶的问题,以前找别人买贴壁细胞培养瓶,结果她给我送成了用于悬浮细胞培养的培养瓶,细胞也是不贴壁,所以,建议你核实一下是不是这个原因
10 回答
9879 围观
10 回答
9879 围观
去回答
问
培养箱出问题,细胞还能用吗?
达达力呀
你是做什么检测的?我们之前遇到过断电的情况,我们是做细胞核型分析的,结果还好。
6 回答
9365 围观
6 回答
9365 围观
去回答
问
血液保存
twoicedragon
将全血离心后取血清-80度保存,全血冻存的话,红细胞会裂解,血清会被红细胞液污染。
2 回答
1981 围观
2 回答
1981 围观
去回答
问
蛋白纯化时为什么检测不到杂蛋白?
kedaxiaoyu
穿透里检测也没有蛋白条带吗?敢问你是用什么洗脱液洗脱的,一般都是用咪唑,0.5M的咪唑柱子上的所有的蛋白基本上都就洗下来了(如果咪唑实在洗不下来的话可以用EDTA洗)……至于你所说的纯化得到目的蛋白,这个咪唑的洗脱浓度还得靠你自己去摸索。你说的是蛋白洗不下来,建议你如果是用低于0.5M的咪唑洗的话,可以考虑0-0.5M的咪唑走个短点的线性梯度,可以大概看下目的蛋白洗脱的大致咪唑浓度。
4 回答
4232 围观
4 回答
4232 围观
去回答
问
WB 条带上出现类似气泡的东西该如何改善?
tao0129
配胶用玻璃板和边条应及时洗净。玻板未洗净的坏处很多:1. 尽管玻璃看似平滑,但是一些细微的凹陷处会凝结肉眼无法分辨的胶颗粒(摸上去疙疙瘩瘩),其坏处是,在该部位极易导致不均匀的胶块,样品经过该处或电泳散热不好,条带变形。2. 如果是RNA的超薄胶,胶板的颗粒会导致局部巨大气泡,非常难于清除;蛋白胶也会导致一些小气泡的产生。3. 玻板没洗净的另一个坏处是,由中学物理知识可知,玻璃表面越光滑粘附越牢,
4 回答
7760 围观
4 回答
7760 围观
去回答
问
做 IP 的抗体为什么会在 WB 中显现出 IgG 条带?
wyf-525
加入的A蛋白抗体和IgG 抗体,在最后一步的煮样中,被β巯基乙醇破坏了结构,变成了重链和轻链,随后由于A蛋白抗体和你的B蛋白抗体种属来源相同,又被你的B蛋白抗体识别出来,所以显影就出现了条带。
2 回答
14772 围观
2 回答
14772 围观
去回答
问
跑WB的内参,只有一个孔没有条带,但是其余的孔都有条带,而且上样量是50ug,怎么回事?
你过de好吗
我的也是,不过我是最后一个孔内参条带没有,跑两次都这样
2 回答
2811 围观
2 回答
2811 围观
去回答
问
稳定株real-time PCR检测表达升高1000倍 WB检测蛋白没有明显变化是为什么?
hl16010921
mRNA的量和蛋白表达量不是线性相关的,有时甚至不是正相关的(特别是抑制核糖体的调控因素时常常如此)。WB反应的是蛋白表达情况,mRNA上升1000倍,但细胞不可能将所有的核糖体都用于翻译这个蛋白,另外细胞膜的空间能容纳1000倍的该蛋白吗(细胞膜本身就镶嵌了大量蛋白,细胞大小不变,膜的表面积也就不变)。还有你看看是否可以用该蛋白敲除的细胞作空白对照,现在无法排除质粒本身会影响该蛋白的內源性表达。
3 回答
3776 围观
3 回答
3776 围观
去回答
问
大鼠肠粘膜组织的蛋白(例:occludin)如何提取?现在用的凯基全蛋白提取液G250,用哪种loading buffer?
Sherlock4ZFB
你好,我想问一下你做的肠粘膜组织是怎么提的?直接划下来吗?还是有其它的方法,能否告知一下?
2 回答
2488 围观
2 回答
2488 围观
去回答
问
ChIP 中收细胞一定要用刮刀吗,可以用胰酶消化收集细胞吗?
越努力越幸运AKSR
分析纯就是37.5%
3 回答
3562 围观
3 回答
3562 围观
去回答
问
蛋白没有表达是啥原因?
大爱蒙奇奇
蛋白不表达可能有很多方面的原因:1:质粒是否成功转化到你的宿主菌。2:改变诱导时机和诱导剂浓度,一般当OD值在0.5-0.6时较好。3:也许蛋白已经表达,只是不是已可溶形式表达的。4:也许是蛋白表达过低,SDS-PAGE不能发现。5:你用的菌错了,要用BL21(DE3).PET22b也的用这个菌。具体的你还得分析,我也不是很了解。
2 回答
4423 围观
2 回答
4423 围观
去回答
问
求问大肠组织标本保存条件及方法?
emily_cby
是否需要加rna保护液
2 回答
3356 围观
2 回答
3356 围观
去回答
问
RNA抽提后出现奇怪情况
114558606zlm
可能是提取的RNA含有杂质或不纯!
18 回答
9592 围观
18 回答
9592 围观
去回答
问
15kd 湿转半小时会不会转过头?
糖guo
如果害怕转过了,可以尝试放两张膜来转,前后两张都显影,看看结果。
7 回答
3918 围观
7 回答
3918 围观
去回答
问
谷胱甘肽标签蛋白包涵体纯化方法?
一乐到底
我也是使用GST标签蛋白,用全式金蛋白纯化方法,试剂盒要求过柱纯化前先变性再复性,在尿素透析复性过程中一直出现沉淀,请问怎么解决
1 回答
2131 围观
1 回答
2131 围观
去回答
问
使用磁珠拉蛋白,会不会使蛋白彻底降解掉?
wyf-525
有就是有,没有就是没有,我们实验室很多人都用不加抑制剂的裂解液洗,只要你的速度赶上蛋白变性的速度就行。
1 回答
1758 围观
1 回答
1758 围观
去回答
问
微球菌核酸酶实验 DNA 电泳一直观察不到 200bp 是为什么?
dxy_gm4sarl3
我是先低渗缓冲液处理细胞,然后取沉淀,直接加入微球菌核酸酶缓冲液和微球菌,
1 回答
3429 围观
1 回答
3429 围观
去回答
问
最后溶解样品用 DEPC 水量多少合适?
dxy_za0jbge8
动物组织或者血清最后加15+20μl
2 回答
5037 围观
2 回答
5037 围观
去回答
问
同一特异不同退火温度的 PCR ,如何确定最佳温度?
王二狗爱科研
温度越高则条带越暗,再高就没条带,我做过
1 回答
1566 围观
1 回答
1566 围观
去回答
问
什么情况下转化平板上会出现卫星菌落?
李存耀
氨苄的抗菌效果的时间段在13-16个小时,一般转化后14个小时菌斑就能够满足接下来下面的实验要求了,菌斑直径在0.5mm左右,16小时后还在37℃下培养就会出现卫星菌
4 回答
9731 围观
4 回答
9731 围观
去回答
1
•••
837
838
839
840
841
•••
1010
跳至
页
意见反馈
合作咨询
提问
扫一扫
领取干货资料
反馈
TOP
打开小程序