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实验问答

23,962,106 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问麻烦问一下，荧光定量PCR ct值误差基本都在0.5范围内，溶解曲线图必须是单峰，复孔的趋势都一致，齐齐的那种吗？

于小鱼鱼1998

不一定必须齐齐的，只要曲线平滑就可以

3 回答543 围观

问肠粘膜屏障效应的评价指标

qzming65

肠粘膜屏障功能生化指标分析可以通过检测血浆D-乳酸、二胺氧化酶、细菌内毒素预测肠屏障患者的肠道功能损伤程度

3 回答1303 围观

问冻在液氮里的组织怎么研磨提蛋白啊，用什么工具

huarenqiang5

步骤如下:1.取米粒大小组织，放入研钵中，加入液氮研磨(反复加液氮研磨)。2.研磨充分后加入RIPA裂解液(RIPA中裂解液与蛋白酶抑制剂PMSF比例为100:1)。3.继续研磨至裂解液化为液体后，吸出裂解液放入1.5ml离心管中，裂解15一30min。4.4℃离心，15000rcf，10min。5.留上清，测蛋白浓度。6.其余蛋白中加6xbuffer，100ul液体中加20ul6xbuffer，

8 回答5990 围观

问提蛋白跑胶总是有杂带，怀疑是提蛋白出了问题，RIPA一定要放在-20么，4度放置一晚上有影响么

balalaLy

RIPA放4度没有太大影响。杂带一般是蛋白降解或者抗体特异性不高、浓度不合适以及洗涤不够充分

8 回答3423 围观

问人工尿液配制好后可以从每个成分的添加量来推算氮磷的浓度吗

生化检验分析

可以的，每种成分添加浓度都清楚，把各种成分氮磷浓度加在一起就是总浓度。

7 回答533 围观

问硅藻用什么培养基培养较好 BG11可以么

sswei

最适合长期培养藻种的培养基是agar（固体琼脂培养基），适合长期保种的贫营养的培养基有这些：Bold’s基础培养基，以及该培养基加上蛋白胨或者琼脂制成的agar，适合长期培养绿藻；Allen及其改良后的配方可以长期培养一般常见的蓝藻和绿藻；土水培养基和它的一个改良的系列也实用培养多数藻种。

6 回答3137 围观

问这几个PI染料哪个更适用于藻类染色啊

weiran0928

这几个商品的CAS号是一样的，应该是同一个东西，可能是不同的状态，比如固体粉末和溶液的区别

4 回答302 围观

问Journal of clinical pharmacy and therapeutics

qzming65

没有问题的，静待结果就好，祝好运哦

4 回答412 围观

问请问有没有做发酵酒试验的？非酿酒酵母具体接种方法？

sswei

在 YPDA 固体培养基上挑取非酿酒酵母菌株接种于 YPD 液体培养基中，于 28℃、170r/min 条件下培养 24 h 制成种子液。将各酵母种子液以 1% 的接种量接种于 YPD 液体和 MSM 培养基中，28℃ 条件下培养, 每隔 2 h 取 200L 菌液于 96 孔板中，使用 BiotekSynergyHTX 多功能微孔板检测仪在 600nm 波长处测定菌悬液的 OD 值, 每个样品重

3 回答477 围观

问铁死亡和氧化应激的区别？

sswei

细胞氧化应激反应涉及到多种信号通路，并且在发育过程、正常生理活动，以及多种病理过程有重要作用。铁死亡（Ferroptosis）是近年来发现的一种受调节的细胞死亡类型。铁死亡主要由几种关键的细胞代谢通路（包括铁代谢、ROS代谢、氨基酸代谢和脂代谢等）的紊乱所导致。最主要的铁死亡调节因子包括GPX4和p53等。铁死亡被证明与正常发育、缺血性器官损伤、神经退行性疾病、免疫系统活动等多种生理或病理过程有关

4 回答2004 围观

问瑞士吉姆萨混染（A液染完直接➕B液）与瑞士吉木萨浸染（A液染完水洗染B液）用的A、B试剂是一样的吗

sswei

瑞士吉姆萨混染（A液染完直接➕B液）与瑞士吉木萨浸染（A液染完水洗染B液）用的A、B试剂是一样的

3 回答535 围观

问请问各位大佬0.2%的苯扎氯铵要怎么配制？一般是用什么试剂溶解？

土井挞克树

可以，0.2g溶于99.8ml溶剂可以得到0.2%的苯扎氯铵，一般用蒸馏水或生理盐水稀释

3 回答1287 围观

问最近纯化的一个病毒的几个不同蛋白，怎么分析这几个蛋白有没有相互污染，蛋白纯化过程中容易污染吗，我理解的是因为不像核酸没有扩增过程，

于小鱼鱼1998

纯化后可以利用his标签进行洗脱，避免相互污染

3 回答345 围观

问HPLC里怎么用自动积分计算放化纯度

土井挞克树

利用HPLC进行蛋白质纯度鉴定主要根据检测器所检测到的色谱图来实现，根据谱图的特异性吸收峰的数量进行判断。HPLC法可以检测丰度小于0.1 ug的杂蛋白，灵敏度较高，是比较精确的蛋白质纯度测定方法

3 回答441 围观

问蛋白质组学质谱数据分析求助？

qzming65

Mascot daemon操作简单，界面简洁，可以根据输入数据分析其中的蛋白质组分，并进行翻译，十分适合研究者使用。

4 回答508 围观

问为什么通过elisa、WB能检测到的蛋白在itraq实验中检测不到？

于小鱼鱼1998

itraq对蛋白纯度要求较高，检测不到可能是因为蛋白纯度不足

3 回答361 围观

问用伽马计数仪测出每个组织/器官的cpm值之后怎么计算%ID/g

高山云初

id/g是每克组织的放射性计数占总注入的放射性计数的百分比。ID/g等于器官的放射性计数/注射药物的放射性计数)/脏器质量。其中注射药物的放射性计数等于注射药物的质量乘(标准管的放射性计数/标准管的质量)。

3 回答3237 围观

问求助各位怎么研究荧光染料标记细菌后，荧光强度随细菌分裂代次的变化情况？

dxy_mqg1dtg8

研究荧光染料标记细菌后，荧光强度随细菌分裂代次的变化情况可以通过以下步骤进行：1.实验准备：准备需要使用的荧光染料和培养基。选择合适的细菌菌株，并进行预培养。根据实验需求，确定合适的培养条件，如温度、pH值等。2.细菌标记：将荧光染料与细菌进行共培养，使其自然摄取荧光染料。根据实验需求，选择合适的荧光染料浓度和处理时间。3.分裂代次控制：根据实验需求，确定细菌分裂的时间间隔和培养时间。每个时间点，

3 回答468 围观

问提的拟南芥蛋白为啥一直杂不出actin,蛋白跑胶染色都是正常的呀

dxy_mqg1dtg8

有以下可能原因导致拟南芥蛋白无法杂交出actin：1.技术问题：可能是实验过程中存在技术操作不当的问题，如蛋白提取、电泳、转印等步骤出现错误，影响了actin蛋白的检测或识别。2.蛋白质稳定性：actin是一种结构稳定的蛋白，其在细胞中具有高度保守性。但是在某些情况下，actin蛋白可能会受到降解酶的作用，导致其在蛋白提取和检测过程中被降解，从而无法被检测到。3.拟南芥基因调控：在拟南芥中，蛋白质

3 回答498 围观

问PCR产物电泳条带不见了，但是溴酚蓝还在胶的中下部。

镍钴镍钴镍

有没有可能你看到的是是二甲苯氰呀？undefinedloading中有两个指示剂，比1undefined的多一个，显示为蓝色，指示条带大概在3000bp左右。

2 回答563 围观

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