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        细胞免疫荧光和WB结果相反这是什么原因

        相关实验:免疫印迹(immunoblotting)

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        糖糖呀lucky

        细胞免疫荧光和WB结果相反这是什么

        原因

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        4 个回答

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        细胞实验的话应该是一致才对的,可能是实验操作误差,比如荧光拍摄参数是否一致

        user-title

        此用户已注销

        有帮助

        可以从以下几个方面来解释:

        1、基因的表达分为转录和翻译两个层面,即mRNA水平和蛋白水平。而真核基因表达的转录和翻译发生的时间和位点存在时空间隔;

        2、在转录后,又会有转录后加工,转录产物的降解,翻译,翻译后加工及修饰好几个层面。所以转录水平和翻译水平并不完全一致,且这种调节在不同蛋白质之间存在差异;

        3、mRNA与蛋白质的半衰期不同,mRNA极易降解,在组织内存在时间较短,而翻译成蛋白质后性质较稳定;

        user-title

        粥辰辰辰辰

        有帮助

        原因1:免疫组化的结果是假的。比如non-specific.建议用另外一个抗体试试。还有找找文献中别人做的结果或推测 原因2:在WB试验中,材料的准备过程,你的蛋白被降解了。或者你的蛋白大么,转膜时间够长么 原因3:因为组织有很多其他细胞,是不是你的蛋白在其中某种细胞中表达比较低,而你的材料中含有这种细胞比较多。因为免疫组化可能放大了你的蛋白信号。纯化你要的细胞

        user-title

        sswei

        有帮助

        可能性是存在的,不同方法评价的方式不同意义也不同,方法稳定性/重现性也不同。 WB只能很粗的半定量,免疫荧光可能要好一些,但也分具体的技术方案。还有所选的抗体是单克隆/多克隆,识别位点,线性表位/空间表位,你所选蛋白是否保持活性等。

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