请问酶切反应加酶未在冰上进行会使酶失活或者活性降低吗？

酶切反应时低于或高于最适温度，都会影响酶的活性，甚至使酶失活，所以酶切反应加酶未在冰上进行会使酶失活或者活性降低

酶切反应（enzyme digestion）通常是在体外进行的生物化学实验，其中限制性内切酶（restriction endonucleases）被用于切割特定的DNA序列。这些酶通常在低温下保持活性，因此在实验过程中需要避免酶失活或活性降低。

限制性内切酶通常需要在低温下（如-20℃或-80℃）保存，以防止酶失活。在使用前，应将酶从冰箱中取出，然后在冰上进行解冻。

在添加酶到反应体系时，确保酶仍然处于低温状态。在冰上加入酶可以确保酶的活性不受影响。

虽然不在冰上进行酶切反应可能导致酶失活或活性降低，但实际影响取决于酶的种类、反应条件以及酶在非冰上暴露的时间。在进行酶切反应时，为避免影响实验结果，建议加酶操作在冰上进行。

低温并不会失活 ，但在高温就会失活。