实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问冻在液氮里的组织怎么研磨提蛋白啊，用什么工具

balalaLy

大块的组织可以用研钵研磨，小的组织可以用1.5ml ep tube有配套的研磨棒研磨

8 回答5601 围观

问提蛋白跑胶总是有杂带，怀疑是提蛋白出了问题，RIPA一定要放在-20么，4度放置一晚上有影响么

balalaLy

RIPA放4度没有太大影响。杂带一般是蛋白降解或者抗体特异性不高、浓度不合适以及洗涤不够充分

8 回答3287 围观

问人工尿液配制好后可以从每个成分的添加量来推算氮磷的浓度吗

生化检验分析

可以的，每种成分添加浓度都清楚，把各种成分氮磷浓度加在一起就是总浓度。

7 回答430 围观

问硅藻用什么培养基培养较好 BG11可以么

sswei

最适合长期培养藻种的培养基是agar（固体琼脂培养基），适合长期保种的贫营养的培养基有这些：Bold’s基础培养基，以及该培养基加上蛋白胨或者琼脂制成的agar，适合长期培养绿藻；Allen及其改良后的配方可以长期培养一般常见的蓝藻和绿藻；土水培养基和它的一个改良的系列也实用培养多数藻种。

6 回答2911 围观

问这几个PI染料哪个更适用于藻类染色啊

weiran0928

这几个商品的CAS号是一样的，应该是同一个东西，可能是不同的状态，比如固体粉末和溶液的区别

4 回答207 围观

问诊断实验meta分析有一篇文章多组数据符合要求

此用户已注销

两个解决办法，1) 2个实验组合并成1组，然后与对照组比较；2) 2个实验组分别与对照组比较，对照组的样本量除以2。

4 回答568 围观

问HK2细胞在96孔板里面长不出来

sswei

可能是细胞生长状态的原因，还可能和自己铺板的密度有关，把细胞加入96孔板之前需要吹匀，加的均匀一点

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问请问有没有做发酵酒试验的？非酿酒酵母具体接种方法？

sswei

在 YPDA 固体培养基上挑取非酿酒酵母菌株接种于 YPD 液体培养基中，于 28℃、170r/min 条件下培养 24 h 制成种子液。将各酵母种子液以 1% 的接种量接种于 YPD 液体和 MSM 培养基中，28℃ 条件下培养, 每隔 2 h 取 200L 菌液于 96 孔板中，使用 BiotekSynergyHTX 多功能微孔板检测仪在 600nm 波长处测定菌悬液的 OD 值, 每个样品重

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问铁死亡和氧化应激的区别？

sswei

细胞氧化应激反应涉及到多种信号通路，并且在发育过程、正常生理活动，以及多种病理过程有重要作用。铁死亡（Ferroptosis）是近年来发现的一种受调节的细胞死亡类型。铁死亡主要由几种关键的细胞代谢通路（包括铁代谢、ROS代谢、氨基酸代谢和脂代谢等）的紊乱所导致。最主要的铁死亡调节因子包括GPX4和p53等。铁死亡被证明与正常发育、缺血性器官损伤、神经退行性疾病、免疫系统活动等多种生理或病理过程有关

4 回答1851 围观

问瑞士吉姆萨混染（A液染完直接➕B液）与瑞士吉木萨浸染（A液染完水洗染B液）用的A、B试剂是一样的吗

sswei

瑞士吉姆萨混染（A液染完直接➕B液）与瑞士吉木萨浸染（A液染完水洗染B液）用的A、B试剂是一样的

3 回答424 围观

问ITRAQ/TMT实验中的“组分”或者“SCX分级”代表什么

土井挞克树

iTRAQ/TMT实验对肽段进行的是2D-LC-MS，其中第一维的色谱分析主要采用的是SCX或者高pH值的HPLC对标记好的肽段混合样品进行初步分离,而将样品分离成10个组分，以此来达到降低每个组分中肽段样品的复杂程度，然后再将这十个组分分别在进行LC-MS，以便能达到更好的质谱鉴定效果。

4 回答344 围观

问培养微绿球藻可以用BG11培养基嘛如果不是用什么培养基好

土井挞克树

可以的，bg11培养微绿球藻效果不错

4 回答571 围观

问做优化工艺，请问下大佬们是做正交实验优化好还是做相应面实验好？已方便后续的文章投稿的话是选择正交试验好还是现在响应面好？

土井挞克树

正交应用的广一些，但是相应面准确度更高一些

5 回答2829 围观

问请问各位大佬0.2%的苯扎氯铵要怎么配制？一般是用什么试剂溶解？

土井挞克树

可以，0.2g溶于99.8ml溶剂可以得到0.2%的苯扎氯铵，一般用蒸馏水或生理盐水稀释

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问构建病毒cDNA如何选择质粒载体？

土井挞克树

第一步:首先看Ori的位置,了解质粒的类型(原核/真核/穿梭质粒)第二步:再看筛选标记,如抗性,决定使用什么筛选标记。

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问iTRAQ/TMT技术相对于电泳技术有什么优势？

小Q医僧

iTRAQ/TMT分辨率高，并且绝大多数蛋白都有定量和定性信息；且iTRAQ通量高，可以一次完成多个样品检测，适合于多组样品间的同时比较以及生物学过程的动态检测。

4 回答459 围观

问为什么通过elisa、WB能检测到的蛋白在itraq实验中检测不到？

于小鱼鱼1998

itraq对蛋白纯度要求较高，检测不到可能是因为蛋白纯度不足

3 回答334 围观

问免疫荧光结果显示药物对细胞骨架有破坏，为什么WB跑不出来趋势？(tubulin, actin)

土井挞克树

可能是上样量太低所以跑不出来，建议提高上样量

3 回答565 围观

问求助各位怎么研究荧光染料标记细菌后，荧光强度随细菌分裂代次的变化情况？

dxy_mqg1dtg8

研究荧光染料标记细菌后，荧光强度随细菌分裂代次的变化情况可以通过以下步骤进行：1.实验准备：准备需要使用的荧光染料和培养基。选择合适的细菌菌株，并进行预培养。根据实验需求，确定合适的培养条件，如温度、pH值等。2.细菌标记：将荧光染料与细菌进行共培养，使其自然摄取荧光染料。根据实验需求，选择合适的荧光染料浓度和处理时间。3.分裂代次控制：根据实验需求，确定细菌分裂的时间间隔和培养时间。每个时间点，

3 回答416 围观

问提的拟南芥蛋白为啥一直杂不出actin,蛋白跑胶染色都是正常的呀

dxy_mqg1dtg8

有以下可能原因导致拟南芥蛋白无法杂交出actin：1.技术问题：可能是实验过程中存在技术操作不当的问题，如蛋白提取、电泳、转印等步骤出现错误，影响了actin蛋白的检测或识别。2.蛋白质稳定性：actin是一种结构稳定的蛋白，其在细胞中具有高度保守性。但是在某些情况下，actin蛋白可能会受到降解酶的作用，导致其在蛋白提取和检测过程中被降解，从而无法被检测到。3.拟南芥基因调控：在拟南芥中，蛋白质

3 回答457 围观

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