请问一下各位大神我的EMSA为什么只有DNA的量在明显减少但是看不到DNA和蛋白的结合条带？

那请问我要怎样优化条件检测我想要的结合条带？另外我梯度添加了一些其他药品，出现的条带是结合条带吗？还是阻遏了结合所剩余的DNA带？高度比DNA条带略高但也只有一点差距，目前并不清楚该标准品对其结合的影响是否正向。