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问
跑电泳条带时两侧上翘,和中间不在一个水平线上是什么原因?
sswei
形成原因:主要是由凝胶中间部分凝固不均匀引起的,多出现于较厚的凝胶中。处理办法:待其充分凝固再做实验
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问
怎么绝对定量分析蛋白含量
土井挞克树
蛋白质绝对定量分析依赖于已知浓度的内标肽(命名为AQUA),内标肽通常由含同位素的氨基酸的组成,以便与天然肽区分开来,利用串联质谱法检测引入了已知浓度内标肽的细胞裂解液,通过内标肽与天然肽的质谱测定比率,可以将天然肽的相对定量数值转化为绝对含量数值,在多肽、蛋白质水平测定以及蛋白翻译后修饰研究中广泛应用。
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问
请问这个蛋白组测序送样本有什么要求嘛?
sswei
1、 样品纯度应达到95%以上(HPLC), 标明准确纯度, N-端必须是均一的高纯样品,并纯度越高,实验结果越理想.纯度可以用采用HPLC,SDS-PAGE或质谱或CE鉴定,建议用2种方法鉴定。2、 样品量不低于50Pmol ,若浓度为5pmol/μl, 体积不少于10μl, 大于10pmol/μl 越好,并标明准确浓度。例如:分子量20000的蛋白,50Pmol约为1微克.3、 标明样品缓冲液
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问
请问PC3细胞贴壁快吗?
sswei
PC3细胞一般贴壁细胞在24h内即可观察到细胞贴壁,从而判断细胞状态,悬浮细胞则复苏后即可观察细胞状态。对于冻存时间较长的细胞,可能需要传代1到2次后,细胞才会调整到正常状态,所以细胞复苏后如果状态不佳,不要灰心,仍要细心培养。
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问
早期自噬和晚期自噬怎么区别?如何界定?
此用户已注销
看是否处于什么阶段,早期是自噬,晚期是降解。
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问
细胞完全培养基配置
sswei
在无菌的细胞培养液中直接添加青霉素-链霉素溶液(100×双抗):按照每500ml细胞培养液添加5ml的比例加入青霉素-链霉素溶液(100×双抗),混匀即可使用。
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问
有老师用过(Rac)-Sograzepide吗?
土井挞克树
这个试剂在不同的实验中浓度差异比较大,所以厂家才会建议你自己摸索,还是做预实验吧,做一个梯度浓度来摸索一下
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问
JC-1染色怎么这样
sswei
线粒体膜电位较高时, JC-1 在基质中汇聚形成聚合物 (J-aggregates),可以产生红色荧光 (Ex/Em=585/590 nm);线粒体膜电位较低时,JC-1 不能聚集在线粒体基质中,以单体形式存在产生绿色荧光 (Ex/Em=510/527 nm)。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。线粒体膜电位的下降是细胞凋
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问
求助铁死亡抑制剂Erastin和RSL3?
于小鱼鱼1998
一般是从0.01的浓度开始,一直可以加到O.1ug/ml
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问
求助,为什么wb两边marker会有印记,洗了半个小时洗不下去
土井挞克树
这个是转印时间太长了导致的,减少转印时间就好了
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问
孟德尔随机化请教
土井挞克树
可以的,近五年的文献多数选用10x5
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问
科研技术
于小鱼鱼1998
可以上KEGG数据库进行查询,这个数据库是常用的通路上下游信号分子查询库
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问
如何验证miRna结合位点是在CDS区的?
土井挞克树
可以通过特异性cds序列进行结合位点验证
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问
实验细胞系咨询
土井挞克树
我们实验室一般都用hmo6,细胞稳定,效果也不错
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问
转染中的氮磷比是氮和磷的什么比,如何计算?
于小鱼鱼1998
氮磷比是指氨氮和总磷的质量比,其计算公式为:氮磷比=NH3-N/TP
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问
新合成化合物的荧光标记
于小鱼鱼1998
可以将抗原和荧光先孵育,连接为共同体之后再与化合物进行连接,从而建立化合物荧光标记
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问
细胞衰老
于小鱼鱼1998
可以的,通过促进程序性凋亡可以抑制dna损伤
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问
这是骨髓间充质干细胞吗?
神乎其神
这个细胞鉴定可以去大的细胞销售网站查看他们的产品图片看一下,另外后期做流式验证下,最好找那种可以调黑背景光圈的倒置显微镜看一看。
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问
共培养T细胞分泌干扰素和颗粒酶B的计算
土井挞克树
可以设置两组干扰素与颗粒酶的单组对照,然后用共同组与单组进行比值,之后对比结果来看哪一种影响大一些
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问
处理后总蛋白减少 可以说明信号通路被抑制吗
feixue7758527w
应该是被抑制了,处理后总蛋白变得少,说明信号通路是被抑制,导致蛋白表达变少的。这个说法还是有道理的。
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