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问
现在大多数期刊要求整膜,但跑整膜效率太低,有什么方法可以提高效率吗?
土井挞克树
浸泡PVDF膜5-10分钟,或者增加转膜时间,一定要注意散热,这很关键,冰融化了要及时更换。
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问
经 WB 检测,未检测到的蛋白,质谱可以检测到吗?
晓雨知春来
WB未检测到的蛋白有些是由于蛋白本身表达量低,抗体难以识别到,也有些是于抗体本身效价低等原因。对于质谱而言,其识别目标蛋白的原理与抗体不同,其可以检测到低丰度的蛋白,但是低丰度的蛋白信号容易被高丰度蛋白掩盖掉,可能需要通过富集或者分流分等前处理方法提高目标蛋白的相对丰度,再进行质谱检测。另外,WB未检测到的蛋白不一定是因为丰度低的原因,也可能是因为抗体效价低、样本中蛋白提取不充分或存在杂带掩盖等原
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问
Wb转膜电压最佳是多少?
晓雨知春来
恒压最佳电压是90V-110V,控制电流不要超过300ma。
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问
做质谱时如何避免样品污染?
晓雨知春来
1. 液质系统使用洁净度和无颗粒物杂质的LC-MS级试剂。试剂应当是在生产是采用0.2 μm进行预过滤的,但是不要在使用前再次过滤,这样会引入新的污染。2. 使用超纯水纯水系统的输出管路如果超过24小时没有水流动,需要打开冲洗20min,以排除微生物增殖。3. 注意添加试剂的使用量• 为了降低背景,使用最少量的、高质量流动相添加试剂(例如,添加0.1
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问
质谱鉴定打出的蛋白非常多是什么原因?
高山云初
蛋白有很大可能性是做实验时不小心混入的污染蛋白,一般搜库之后都会将这些污染蛋白去除的。
4 回答
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问
处理FFPE样本的时候,不同成分的裂解液对结果的影响大不大?
周末也要努力呀
不同批次只要裂解完全,结果差异就不大
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问
怎么判断细胞有没有被支原体感染,有没有什么好的方法补救呢
Keven轩
有支原体感染的检测试剂盒,一般就算补救回来细胞状态也不好
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问
条带结果为啥拉的这么长
周末也要努力呀
跟胶有很大关系,建议制备胶过程中混匀涡旋。其次,可以试一下预制胶,假如不一样,那就可能是胶问题了。
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问
内参总是一条线是啥原因
周末也要努力呀
可以用少孔梳子。其次减少蛋白上样量,此外,还与胶有关系,预制胶好一些。
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问
图片类型的ppt如何才能变得可编辑
小小翻车鱼
要让图片类型的 PPT 文件变得可编辑,可以尝试以下几种方法:1. 使用其他软件转换:您可以尝试将 PPT 文件转换为另一种格式,如 HTML 或 PDF。然后将转换后的文件导入到 PowerPoint 中,这样您就可以编辑其中的文本和图形了。有许多在线工具可以帮助您完成这个任务,例如 Zamzar或者 Smallpdf。2. 使用 OCR(光学字符识别)技术:如果 PPT 文件中的文本是以图片形
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问
RAW264.7转染快两个月了,用的吉凯的慢病毒,转染效率还是特别低,有没有大神给我指导一下啊?快疯
土井挞克树
可以提高转染的浓度和时间,通常都是时间不足
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1003 围观
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问
GC-MS非靶向检测,样品需要做衍生化,加一个内标够吗?
周末也要努力呀
我们做的细菌的GCMS,一个是够的,我们一般使用核糖醇作为内标
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1615 围观
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问
反转录体系中加入几微升pbs会有什么影响?
晓雨知春来
在反转录体系中加入几微升pbs一般不会有太大的影响。?
3 回答
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问
兄弟们,关于使用通路激活剂,怎么确定最佳浓度啊
balalaLy
看这个通路里边的经典蛋白的变化
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1828 围观
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问
分子免疫荧光表达量的评价
粥辰辰辰辰
组织切片免疫荧光的表达量看染色密度的
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问
有没有一个可能,某个转录因子对下游分子表达的影响在不同组织不一样呢?在这个组织细胞是上调,另一个是下调?
ywb597747367
https://www.nature.com/articles/ncb3613可参考本文献。在给出的文献中,DKK1(非转录因子)对乳腺癌肺转移为抑制作用,而对骨转移为抑制作用
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问
用乙醇回流提取得到的液体,过滤后,浓缩到什么样的程度就可以不用浓缩了,然后冷冻冻干?
土井挞克树
一般浓缩到90%左右就可以进行冷冻冻干了
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问
荧光定量PCR数据分析问题
周末也要努力呀
对照组CT值不显示可能因为你上样不准确,正常来讲对照组应该是最好做的。也可能因为引物特异性不好,CT过大导致超过机器预设值。排除因素后继续实验,同一次做出来的可以做分析,不同时间补对照组是不准确的。
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问
LC3B
周末也要努力呀
可以在原有基础上增加上样量或者更换抗体继续跑这个条带。
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问
RNAscope阳性没信号,是什么原因?
亮婆婆
请问后面做出来了吗?我是目标探针没有信号,阳性好的,给跪了
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