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问
植物蛋白质的提取方法及注意事项?
迟C迟
1、将组织称重,减去EP管重量,研磨一定要充分2、每100mg组织加入1mL(1mg ,10ul)试剂,冰上裂解半小时3、匀浆(注意低温操作),开20秒,关2秒,共打20次,每次用水冲洗,擦干,超声完后放冰上4、将匀浆液移至1.5mL预冷离心管5、离心,12000转,4℃,30分钟6、取上清至新的预冷的EP管7、BCA定量8、放入—80℃
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问
人多能干细胞培养基都需要什么成分
迟C迟
基础培养基为DMEM/F12培养基;添加剂包括碳酸氢钠400~600 μ g/ml、硒酸钠8~20ng/ml、重组人胰岛素生长因子10~30ng/ml、重组人碱性成纤维细胞生长因子80~120ng/ml、重组人乳铁蛋白7~13 μ g/ml、抗坏血酸50~70 μ g/ml以及重组人转化生长因子lng/ml~3ng/ml。
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问
怎样实现单细胞测序数据最大化
迟C迟
单细胞数据分析的第一步就是分亚群(当然前期肯定是需要先做数据预处理的),通过样本比较发现新的细胞亚群或比例差异显著的亚群。亚群分好之后最重要的一步(也是最难的一步)就是对亚群进行细胞类型注释了。我们会结合细胞类型marker基因、细胞类型注释软件和文献数据做比对的方法综合进行注释。第二步:寻找marker标志,根据自己实验数据的分类亚群,找每一个亚群特异表达的marker基因。如果某个亚群只在疾病
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问
咋写阿尔兹海默文献综述?
大草原的小灰驴
建议先完善一下查找文献的资料,有效提取其中的关键点,然后依据文献的标志物撰写相关的综述。
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问
透射电镜,请问各位大神,我做的颗粒物,它不溶,现在要收集细胞做电镜,可是那个颗粒物怎么把它过滤掉呀?
Topmicro
颗粒物直径多大?可以选择合适孔径的尼龙网过滤,比如70微米或者120微米。
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问
做WB,跑胶的时候,有黄色的拖尾,有一个孔甚至都直接变成黄色的了,想请教一下是胶的问题还是别的什么原因
cxsm
可能是loading buffer的PH吧
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问
做MTT实验时,铺板时间太长,会对细胞有影响吗?多久时间会对细胞有影响?
cxsm
这很难说,要尽量保证细胞的生长空间和营养物质的提供
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问
纸层析定性糖类物质,显色剂里的硝酸银的水丙酮饱和溶液,加多少硝酸银啊?配方:AgNO3的水丙酮饱和溶液,V水:V丙酮=1:200
天一湖医者
硝酸银O.1g溶于水lml,加2-苯氧基乙醇lOOml,用丙酮稀释至200ml,
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问
关于细胞凋亡的流式细胞术
天一湖医者
流式图有很多种,最常用的是流式直方图和流式散点图,还有流式等高线图。流式直方图只能显示一个通道的信息,流式散点图和流式等高线图可以同时显示2个通道的信息。 流式通道 散射光通道 散射光通道有两个,包括FSC通道和SSC通道,一般所有的流式细胞仪均有这2个散射光通道; FSC,即前向角散射,它的值代表细胞的大小。细胞体积越大,其FSC值就越大。所以可以利用细胞的FSC值初步比较细胞的
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问
中和抗体实验中加病毒对照的时间及原因。
Topmicro
加病毒对照的时间根据细胞类型确定,一般用处于生长相刚达到完全融合的细胞进行病毒滴定。
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问
sashimi plot 图怎么看呢,图里的线线上的数字以及不同的线连接,这些都是啥意思呢,整不明白了
天一湖医者
IncLevel1可被认作是exon inclusion level(ψ),是Exon Inclusion Isoform在总(Exon Inclusion Isoform + Exon Skipping Isoform)所占比例I 是指mapping到exon inclusion isoform上的reads数,对应结果表格中的IC_SAMPLE_1S 是指mapping到exon skippi
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问
质谱中肽段匹配打分是怎么来的,代表什么
异乡人hyq
做PMF一般得分超过60分(P<0.05)就算成功鉴定,而串联质谱,得分超过60分或者虽然没有超过60分,但是有最少一条肽段的得分超过30分就算成功鉴定。
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问
质谱中的假阳性和假阴性什么意思
lzy必有我师
我们讲的假阳性通俗一点就是并不是真正的阳性,假阴性也就说明不一定就是阴性,而是阳性,但有可能因为某种特定的因素导致其结果是阴性的。
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问
rna和探针加热变性后,在冰中速冷多久合适
大草原的小灰驴
我们一般放置在冰盒中三分钟以上。时间太短作用会不充分,无法防止形成双链结构,时间太久会可能RNA不稳定容易降解掉。
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核酸斑点杂交杂交真空干燥的,压力有要求吗,为什么我的东西都固定不上
天一湖医者
压力一般没有要求,真空短暂干燥后用50ulTE溶液溶解沉淀。
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问
从左到右依次为input,IgG,IP。蛋白分子量是110kD,但是IP组的蛋白条带在100kD。请问这个结果能用吗?
dxy_9elsat18
可以用。IgG 家族有4类: IgG1,IgG2, IgG3, IgG4. IP 共沉淀其中一类,分子量在100 Kd 左右。
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问
请问有没有合成过配体为FMN的亲和胶?
异乡人hyq
FMN可偶联的有限,FMN的结构上也有个仲胺,可以偶联到带长手臂的环氧活化的填料上。
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问
蛋白质纯化实验过程中,标签包涵体蛋白易洗脱,怎么解决这个问题?
异乡人hyq
原核蛋白表达纯化是很容易形成包涵体的,在现阶段可以采用俩种手段,一是预防,二是复性。预防就是指在蛋白过表达形成包涵体前,对表达环境进行优化的一些手段,来降低重组蛋白合成的速率。例如:密码子优化,表达温的选择,与分子伴侣或折叠酶共表达等等;而蛋白质的复性则是指:在变性条件不剧烈,变性蛋白质内部结构变化不大回时,除去变性因素,在适当条件下变性蛋白质可恢复其答天然构象和生物活性的方法。
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问
刚染毒的细胞有必要做细胞恶性程度鉴定吗
dxy_u3sb70e2
可以鉴定 也可以每隔一段时间鉴定
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问
传代细胞培养胰酶时间问题?
Topmicro
胰酶消化时间得根据你的细胞特点来定,一般控制在1-3分钟左右,你可以每隔一分钟吹打试一下。
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