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问
流式细胞上样速度如何确定
bamboopiggy
上样速度决定分选速度,推荐上样速度取决于你用到用的机器,有个最适的速度,看你用的流式的说明。和细胞大小关系不太大,却决于细胞浓度。
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问
怎么最大可能筛选到高细胞活性
bamboopiggy
胰酶消化不能过,反复吹打次数也别太多,保证比较高的细胞浓度,都可以提高细胞活动。
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问
细胞样本制备形态问题
bamboopiggy
胰酶消化时间要够,但是又不能过,反复吹打也不能太多次,否则细胞还是会受损,这个多做几次,摸好条件。
2 回答
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问
流式细胞影响分选的结果有哪些?
bamboopiggy
确保单细胞悬液,细胞浓度够,否则时间会很长。
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问
流式细胞筛选标准问题
bamboopiggy
对,做分选,最大的问题就是细胞的皮实程度,如果细胞不够皮实,确实问题很大。可以考虑用growth mediun培养分选后的细胞。
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问
请教各位大神,这个图要如何解读?尤其是左上的DAPI染色?
bamboopiggy
每个图上标的蛋白的颜色,和图中染的颜色是一致的,感觉你这俩蛋白在胞浆,没有和dapi重叠,但是你这俩蛋白可以共定位
1 回答
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问
细胞流式分选得率不够
bamboopiggy
如果得率不够,你又不能提高你的处理方式的话,只能提高细胞量。
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问
小胶质细胞好用的marker
天一湖医者
小胶质细胞常用好用的marker
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问
想问下细胞突然变得不好消化了是什么原因
bamboopiggy
1.可能是你养的时间太长了,细胞一层叠一层,不是单层了,所以胰酶难消化。2,可能胰酶失效了。
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问
慢病毒转染细胞的构建筛选
bamboopiggy
嘌呤霉素筛的还是比较快的,一般1-2周就可以了。主要看细胞状态。
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2278 围观
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问
细胞复苏传代后养变形了是怎么回事?
Topmicro
细胞复苏传代后变形很正常,像ht-29细胞传代之后可能会长成像上皮组织的形态。
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928 围观
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问
THP1这种悬浮细胞如何进行基因敲除?如何挑单克隆?
bamboopiggy
THP1 最好用电转,用病毒都不一定能进去。敲完以后,你可以用流式做单细胞打板就可以
2 回答
1143 围观
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问
怎样拯救污染了的细胞,培养过夜的细胞有黑色点。
bamboopiggy
如果能有替代,尽量扔掉,否则可是试试加各种你能弄到的抗生素,尤其是两性霉素B吧。
3 回答
569 围观
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问
细胞冻存传代多久一次比较适合?
异乡人hyq
原代分离的细胞最好在3代以内,如果是无限传代细胞无所谓。
4 回答
2638 围观
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问
肺癌细胞生长缓慢怎么办
Topmicro
需要先肺癌细胞生长缓慢的原因,可能是菌株嗯原因,也可能是培养液和血清的原因,可以先更换血清试试。
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545 围观
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问
细菌QPCR相关问题请教
Topmicro
你提取的RNA肯定是有问题的,不单纯是纯度的问题,你最好使用试剂盒来提取,简单还能保证提取质量,可以用天根的试剂盒。
3 回答
1086 围观
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问
蛋白表达量不高是什么原因?
Topmicro
蛋白表达量不高的原因有很多,比如表达用载体是否合理?培养液是否需要优化?
6 回答
868 围观
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问
目的蛋白没有条带是什么原因?
Topmicro
目的蛋白没有条带的原因有很多,比如目的蛋白没有表达或者表达之后又降解了。
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2083 围观
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问
活久见系列:细胞发霉啦
dxy_gwrp7ndq
灭菌时间长不一定就彻底,还得看你的灭菌锅效率高不高,还有可能你培养基刚出锅就又污染了,培养基的放置环境很重要,培养瓶的选择也很重要
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问
HUVEC 复苏后,传到三代以后整批污染?
dxy_gwrp7ndq
可能的污染有支原体、衣原体和黑胶虫,出现黑胶虫,这种小黑点一样的东西是可以在局部范围内移动的,而且最开始不会影响细胞状态,长多了培养基变浑浊,细胞死亡。值得一提的是这三种污染都不能独立存在,必须有细胞参与,所以继续培养的无菌实验不能排除这三种的可能性。HUVEC既然是取原代细胞,很有可能会带有这样的污染,尤其是像衣原体和黑胶虫这样在细胞内寄生的污染。
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