3 个回答
土井挞克树
有帮助
浸泡PVDF膜5-10分钟，或者增加转膜时间，一定要注意散热，这很关键，冰融化了要及时更换。
周末也要努力呀
有帮助
效率和完整性不可兼得。你可以孵育一抗完再洗脱后重新敷另外一个抗体，这已经是最快的了
sswei
有帮助
可以考虑：转移缓冲液中加入20%甲醇(是指终浓度)(优化的转移缓冲液，可以参考《蛋白质技术手册》)，因为甲醇可降低蛋白质洗脱效率，但可增加蛋白质和NC膜的结合能力，甲醇可以防止凝胶变形，甲醇对高分子量蛋白质可延长转移时间；转移缓冲液加入终浓度0.1%SDS ，也是为了增加转移效率；用优质的转移膜，或使用小孔径的NC膜(0.2微米);使用戊二醛交联；低浓度胶，如低至6 %。太大时还可以考虑用琼脂糖胶；提高转移电压/电流；增加转移时间。
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