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        最近好几次Western blot出来的结果不满意,怎么办呢?

        相关实验:🔥 原代细胞培养实验

        user-title

        dxy_btpk2zd7

        Western Blot 曝光出来条带发黑发暗,没有出现荧光,而且出现过好几次这种情况,可咋整??

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        8 个回答

        user-title

        丁冉1234

        有帮助

        有可能是曝光液时间久了失效或是条带上沾了太多的曝光液

        user-title

        dxy_nkqusvl2

        有帮助

        二抗孵育时间过长,或者是未能完全封闭,建议重配封闭液,充分溶解

        user-title

        半糖奇朵

        有帮助

        是所有的条带都是这样吗?如果是都是这样,要考虑转膜,封闭的问题;如果只是一个目的分子的条带这样,那就局限在这个目的分子这里,看看抗体稀释比例或者稀释液这些

        user-title

        洛噜啦噜啦嘞

        有帮助

        一般是显色液不足导致的,建议考虑一下

        user-title

        未来9

        有帮助

        有可能是显色液的问题,你可以重新配好显色液,然后滴加到PVDF膜上,正反都加一遍,注意避光操作

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        封闭没有做好,抗体有比较严重的非特异性吸附。解决:用5%的无糖低脂的奶粉做封闭,效果比BSA的还好还便宜。时间要摸索下。

        环境光源污染。解决:一个好的暗室。

        试剂问题。配置新鲜的试剂。

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        时间太长了?时间越长荧光越弱。或者看看封闭问题

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        抗体是反复用的吗?可能是抗体坏了。如果是新抗体,可能需要摸条件

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