猪肺原代肺巨噬细胞生长速度比较慢，贴壁效果不好怎么办

细胞生长速度慢的解决办法:

增加起始培养细胞浓度；

换入新鲜配制培养液；

补加生长因子；

血清需要保存在5℃到20℃，培养液需在2-8℃避光保存；

含血清培养液在2-8℃保存，并在2周内用完；

要轻轻吹打消化细胞；

分离培养物，检测支原体；

比较新培养液与原培养液成分，让细胞逐渐适应新培养液。

细胞不贴壁:

细胞的传代最重要的是胰酶处理时间：消化不够细胞本身就是成团的；若胰酶处理太久，容易造成细胞膜蛋白损伤，使细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。

缺少贴壁因子：血清中含有促贴壁因子，而无血清培养基工艺中由于缺少这种促贴壁因子，细胞的贴壁效果会下降很多。

支原体或细菌的污染。

培养液配置、储存不当，如pH值过碱，Gln量太少等原因。

复苏的细胞本身状态不好，已经老化，失去贴附性。

接种细胞数目太少，无法分泌足够的细胞外基质。

复苏时处理速度太慢，复苏过程不当。

可以尝试在培养皿里先铺一层促贴壁试剂

首先要排外感染；然后可以试试更换培养基等等

原因有很多，你可以先把细胞离一下心，换上新鲜的培养液和新瓶子继续培养。如果细胞密度过高也会影响贴壁，假如细胞贴壁性不好可考虑换用一次性塑料瓶培养。

1.细胞具有密度依赖性，适当提升铺板浓度

2.改善营养体系

3.血清浓度适当增加