实验问答

21,812,643 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问流式细胞上样速度如何确定

bamboopiggy

上样速度决定分选速度，推荐上样速度取决于你用到用的机器，有个最适的速度，看你用的流式的说明。和细胞大小关系不太大，却决于细胞浓度。

3 回答855 围观

3 回答855 围观

问怎么最大可能筛选到高细胞活性

bamboopiggy

胰酶消化不能过，反复吹打次数也别太多，保证比较高的细胞浓度，都可以提高细胞活动。

3 回答359 围观

3 回答359 围观

问通常选择什么滤网比较合适？

bamboopiggy

滤网有份型号，有不同孔径的，一般上流式用300-400目的比较好。也可以直接买带滤网的流式管

3 回答359 围观

3 回答359 围观

问流式时得不到比较合适的浓度

天一湖医者

这个有两个办法,一是在上机前计数（可以用血细胞计数板,或者细胞计数仪）还有一个就是把样本上机后,根据机器得到的浓度现调（用PBS等缓冲液稀释）

2 回答166 围观

2 回答166 围观

问细胞样本制备形态问题

bamboopiggy

胰酶消化时间要够，但是又不能过，反复吹打也不能太多次，否则细胞还是会受损，这个多做几次，摸好条件。

2 回答332 围观

2 回答332 围观

问流式细胞影响分选的结果有哪些？

bamboopiggy

确保单细胞悬液，细胞浓度够，否则时间会很长。

2 回答647 围观

2 回答647 围观

问流式细胞筛选标准问题

bamboopiggy

对，做分选，最大的问题就是细胞的皮实程度，如果细胞不够皮实，确实问题很大。可以考虑用growth mediun培养分选后的细胞。

1 回答296 围观

1 回答296 围观

问细胞流式分选得率不够

bamboopiggy

如果得率不够，你又不能提高你的处理方式的话，只能提高细胞量。

2 回答398 围观

2 回答398 围观

问THP1这种悬浮细胞如何进行基因敲除？如何挑单克隆？

bamboopiggy

THP1 最好用电转，用病毒都不一定能进去。敲完以后，你可以用流式做单细胞打板就可以

2 回答910 围观

2 回答910 围观

问流式细胞学检测时细胞有很多碎片

丁香清香

流式细胞学细胞碎片应该是死亡细胞

3 回答2904 围观

3 回答2904 围观

问细胞培养需要注意哪些细节？

异乡人hyq

在细胞培养过程中，除了细胞本身的生长特性，环境也会影响细胞的状态。1：细胞生长的附着物或支持物性质（如：细胞培养瓶/板或细胞培养载体）；2：细胞培养基的理化性质和成分；3：气相成分；4：培养温度等。合适的培养环境才可以使细胞表现出特定的功能。

5 回答681 围观

5 回答681 围观

问贴壁细胞，漂浮细胞特别多

bamboopiggy

多传几代，如果一直有悬浮细胞多，考虑减少胰酶消化时间，因为悬浮的都是死细胞

3 回答3734 围观

3 回答3734 围观

问肺癌细胞生长缓慢怎么办

Topmicro

需要先肺癌细胞生长缓慢的原因，可能是菌株嗯原因，也可能是培养液和血清的原因，可以先更换血清试试。

4 回答237 围观

4 回答237 围观

问淋巴结组织细胞流式固定

丁香清香

根据方法而定，不能一概而言。如果是测细胞内抗原的，比如抗体识别活化caspase-3, 那就要固定。其他检测功能的，比如caspas3-3活性的，就要活细胞来测试。

2 回答597 围观

2 回答597 围观

问细菌QPCR相关问题请教

Topmicro

你提取的RNA肯定是有问题的，不单纯是纯度的问题，你最好使用试剂盒来提取，简单还能保证提取质量，可以用天根的试剂盒。

3 回答780 围观

3 回答780 围观

问蛋白表达量不高是什么原因？

Topmicro

蛋白表达量不高的原因有很多，比如表达用载体是否合理？培养液是否需要优化？

6 回答608 围观

6 回答608 围观

问目的蛋白没有条带是什么原因？

Topmicro

目的蛋白没有条带的原因有很多，比如目的蛋白没有表达或者表达之后又降解了。

6 回答1696 围观

6 回答1696 围观

问活久见系列：细胞发霉啦

dxy_gwrp7ndq

灭菌时间长不一定就彻底，还得看你的灭菌锅效率高不高，还有可能你培养基刚出锅就又污染了，培养基的放置环境很重要，培养瓶的选择也很重要

6 回答536 围观

6 回答536 围观

问有人跑过hes5，light的wb吗？跑了结果不理想，有什么条件跑wb供参考吗。提这2种蛋白有特殊的吗？

bamboopiggy

你所谓的结果不理想是条带不清楚还是没有？条带不清楚，可以尝试增加抗体浓度或上样量，没有条带可以尝试跑全膜

2 回答403 围观

2 回答403 围观

问HUVEC 复苏后，传到三代以后整批污染？

dxy_gwrp7ndq

可能的污染有支原体、衣原体和黑胶虫，出现黑胶虫，这种小黑点一样的东西是可以在局部范围内移动的，而且最开始不会影响细胞状态，长多了培养基变浑浊，细胞死亡。值得一提的是这三种污染都不能独立存在，必须有细胞参与，所以继续培养的无菌实验不能排除这三种的可能性。HUVEC既然是取原代细胞，很有可能会带有这样的污染，尤其是像衣原体和黑胶虫这样在细胞内寄生的污染。

5 回答826 围观

5 回答826 围观

关于丁香通

公司信息

个人用户

企业机构

无忧采购轻松科研

无忧采购轻松科研

提问

扫一扫

丁香实验小程序二维码

实验小助手

丁香实验公众号二维码

扫码领资料

反馈

TOP

打开小程序