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问
各位老师我想问一下WB电流大小是与膜的面积有关吗? 这怎么算膜的大小面积?然后用多少ma电流啊?
bamboopiggy
你是说转膜的电流吧?这个和你的机器有关系,和你膜的面积的大小关系不大,你买的是湿转的,还是半干转的?问买的业务员,可以用多大电流。
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问
想请教一下各位大佬,胶倾斜是什么原因呀?
bamboopiggy
你灌的不匀,所以积层胶和分离胶之间没有压住
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问
如何证明三个蛋白能形成三聚体?
bamboopiggy
首先用co-ip,a能拉下b和c来,b能拉下a和c来,c能拉下ab来,然后跑native 胶,三聚体的大小应该是三个蛋白分子量的总和。
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问
亲和标记法和膜重建法鉴定膜上蛋白质是否为膜转运蛋白的方法?
whilt-shirt
可以选用荧光标记或者His探针试试
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问
活体成像c57灌胃带荧光菌液必须脱毛么?
balalaLy
一般都会剃毛比较好,毛发会带有背景荧光造成干扰。
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问
求助:od为2的引物稀释方法?
未来9
1nmol用10ul ddh2o稀释,浓度为100um,此浓度为储藏浓度,工作浓度要稀释到10um.订引物时候,填10nmol就可以了,不用管 od
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问
为提取结核杆菌的RNA,如何破壁?
未来9
可以采用超声波联合Trizol法、玻璃珠(简称"玻珠")联合Trizol法(简称"玻珠法")和Trizol法(简称"不加玻珠法"),对结核分枝杆菌进行破壁,提取总RNA
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问
DNA提取过程中内源性核酸酶如何有效抑制?
lyang556
在提取内源核酸酶含量丰富的材料的 DNA时,可增加裂解液中螯合剂的含量,细胞裂解后的后续操作应尽量轻柔。
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问
最近贴壁细胞传代,胰酶消化到光镜下细胞脱落到大片成团终止消化,吹打离心重悬,但传好的培养瓶里总是有成团的细胞没散开,是什么原因呀
whilt-shirt
这种情况一般是没有完全吹散,建议反复多次吹打
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问
WB跑胶条带跑不开是什么原因呢?
whilt-shirt
有可能是胶的原因,建议选择相应浓度的分离胶
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问
发现细胞里有一些小的团块 贴壁不知道是不是污染了?
Keven轩
应该是真菌污染,及时扔掉然后清洗培养箱
4 回答
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问
真菌DNA提取时能否患酶呢
dxywode
用CTAB法非常好,不用酶类,而且效果很好,我就是用这个提的。
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问
PCR试验中双链互补的问题?
bamboopiggy
在CpG岛两端设计引物进行PCR,pcr过程中,随着pcr引物的延申,T的互补生成A,C的互补生成G,不会不互补
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问
RNA提取结果,遭遇亮区干扰,咋办(・o・)
bamboopiggy
你跑的是动物组织还是植物组织?用的是变性胶还是非变性胶?尝试用RNase处理一下看看还有没有,如果没有,可能是28S降解,如果有,可能是DNA或蛋白质污染。
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问
细胞真菌污染怎么避免,如果已经污染了,通过pbs洗有用么
未来9
真菌污染预防方法:1),将细胞移出来,用微量硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内,再把水盘里加适量硫酸铜或者酸氢二钠高盐液体防止霉菌2)孵箱应定期清洁,大约一个月左右清洁一次,3)可在培养基里加两性霉素或制霉菌素)或[放线菌素D或双抗进行预防。4)最主要的还是要培养良好的无菌观念,实验室尽量不要大声说话,佩戴好口罩,手套,操作时应小心,避免培养基撒入培养箱以及生物安全柜,这些撒入培养箱的培养基为细菌及真菌的
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问
MKN45细胞不太好消化,大约消化多长时间才合适,如果消化损失过多会导致污染么
dxywode
消化我一般都胰酶在37°消化4分钟后,才能消化下来。就只能这么养,现在已经传了好多代。
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698 围观
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问
用BioRad跑RT-PCR,不同的SYBR跑出来的GAPDH会有很大差别么,一个15+一个18+,但是样品差不多,选择哪个
whilt-shirt
可能是试剂的稳定性不太好,建议重新跑一板
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538 围观
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问
细胞培养过程中如何保持细胞的低分化状态?
未来9
动物的细胞在细胞培养过程中只能增殖不能分化,在实验室养了无数次细胞,既不会分化,也不会无限增值,正常50代左右。癌细胞可无限增殖,但也不会分化。 动物细胞的培养有各种用途,一般而言,动物细胞培养不需经过脱分化过程
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307 围观
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问
想比较多个样本中单个细菌的丰度差异,用什么统计学方法?T检验可以吗?如果样本太多,会不会造成I类错误?
Keven轩
T检验没问题,其他的检验方法合理的都可以
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问
在构建质粒时,菌落pcr的条带都是对的,但是测序结果都是缺少目的基因那一段,这是为什么呢?
汤姆卜丽波
可以做个菌液pcr再看看,有很大可能性是连接产物中有剩余目的基因,也可以单扩一个引物看看是不是引物污染,提个质粒跑一下
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