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        我合成了一段序列,公司送来了液体状态的质粒,我做了转化,两天才长出来一个菌落,这个正常吗?

        相关实验:重组质粒的连接、转化及筛选

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        宁儿小贤

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        9 个回答

        user-title

        汤姆卜丽波

        有帮助

        测一下质粒浓度,然后估计是抗性平板没选择对。

        user-title

        dxy_a3ehs9w7

        有帮助

        通常情况下,肯定不正常。细菌繁殖很快,过夜就可以观察到了菌落。

        user-title

        迟C迟

        有帮助

        什么质粒,如果质粒比较特殊,序列比较长,两天长出来也是可能的,观察菌落形态是否正常,做好必要的验证即可。

        user-title

        Keven轩

        有帮助

        不太正常,应该是菌在冻存的过程中死的太多了,或者是质粒浓度太低

        user-title

        Guoood

        有帮助

        建议跟公司沟通,了解这种质粒的抗性及使用的感受态菌种类,两天才长出的菌不一定是目的质粒的菌落,也可能是杂菌。

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        不正常,这么长时间,可能是杂菌。你先和公司确定你没有弄错平板的抗性。然后再测个浓度,看有没有质粒

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        一般的情况是10h后可以看到菌落,14-16h就可以做下一步鉴定了,建议你重新确认平板抗生素的正确与否,重新做连接转化。

        user-title

        dxywode

        有帮助

        建议你重组吧,原来重组好的质粒很可能没有了,实在不行在找人要原来的质粒,我曾经因此耽误了几个月。

        user-title

        未来9

        有帮助

        转化不长菌的原因很多。

        1感受态细胞不行,这个一般都是同时转化一个已知的质粒,如果质粒长了,就可以排除。

        2转化过程发生错误,同样用质粒做对照。

        3抗生素加错了或者抗生素浓度过高。

        4连接不成功。转化时连接产物的浓度最起码要十几纳克,如果只有几纳克,转化效率再低点,就不长菌了。另外如果是平末端连接的话,效率更低。

        做转化要加对照的,一个阳性一个阴性。你这样不加对照去做,很难找到失败的原因

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