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        PCR中的CT值问题

        相关实验:逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR,rtpcr)

        user-title

        dxy_btpk2zd7

        伙伴们,用大鼠肝脏提取RNA做PCR,内参CT值一直20左右。师兄说CT值过高,用的试剂,逆转录用的takara 的,pcr用的罗氏的,两家步骤不一样,是不是会对CT值有影响?

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        4 个回答

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        逆转录酶反复冻融或者使用过程中没有确保在冰上进行会使酶活性降低,内参的CT值会升高,导致实验结果出现相反的方向。

        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        常规内参的CT值在15-20之间,你这个内参还好,建议重新跑一板看看,如果还是这样换个试剂试试

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        逆转与PCR试剂不同,会对CT值产生影响。

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        伙伴们,用大鼠肝脏提取RNA做PCR,内参CT值一直20左右。师兄说CT值过高,用的试剂,逆转录用的takara 的,pcr用的罗氏的,两家步骤不一样,是不是会对CT值有影响?

        CT值内参20左右可以,你的目的基因呢?如果目的基因在25-35之间,没问题的,并不需要反转录试剂盒和pcr的试剂盒一定要配套。

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