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        最近贴壁细胞传代,胰酶消化到光镜下细胞脱落到大片成团终止消化,吹打离心重悬,但传好的培养瓶里总是有成团的细胞没散开,是什么原因呀

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        不不不不不苦的香葱蛋饼

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        3 个回答

        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        这种情况一般是没有完全吹散,建议反复多次吹打

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        未来9

        有帮助

        可以从以下方面找原因:

        1,你消化过度了,消化过度的细胞会成片的卷起,吹打的时候是不容易吹散的,这样你接种的细胞肯定成团生长,所以一般消化时间一定要把握,细胞变圆即可终止,不必等到全浮起来,
        2,你吹打的时候是不是吹打的够充分?一般用15毫升的离心管就好了,管子粗了是不好吹打的,细胞肯定成团,而且吹打的时候尽量不要吹打出泡沫,这样以来很损失细胞,二来也容易污染.
        细胞一旦成团一般很难生长,虽然会贴壁,但是分布极不均匀,成团的细胞实际上缺氧生长,你发现成团以后,可以继续在瓶里吹打细胞,这样也许能补救

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        可能这个细胞就是爱扎堆生长,实在不行,你试试降低种板的细胞浓度,然后对成团的,再进行消化

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