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转投期刊咨询
府宅
期刊审稿偏慢,要4-8周,录取较难
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问
大家好,我是新手,最近做的WB结果,请大家点评谢谢谢谢!
bamboopiggy
你gapdh太强了,和你的目的条带分开显影,不要一起显,应该都会出来的。
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问
请教各位,内参不齐,怎么判断是转膜夹的问题还是上样量的问题呢
宁儿小贤
如果测过bca,调整过样品浓度的话就一般不是上样量的问题,看你的图不太像转膜夹的问题。
5 回答
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问
请问显影膜上有黑点是什么原因?
宁儿小贤
膜上的黑点就是脏东西,膜很容易吸附其他物质,每次洗的时候时间长一点,多洗几次,镊子夹在同一个地方,尽量不要碰别的地方
7 回答
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问
FLG跑WB一直跑不出来……
天一湖医者
可能原因:1、孵一抗的方法;2、抗体;3、曝光时间;4、转膜;5、手法不稳定;6、其他你根本没察觉到但对结果影响大的小毛病。
3 回答
723 围观
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问
细胞传代离心不下来
bamboopiggy
不是离心机的问题,感觉是你们细胞消化过了的样子,要不你镜下看看消化程度,然后收细胞。
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问
内参不齐这是什么原因?样品浓度是5
bamboopiggy
1 可能这个管家基因不适合在你的实验中做内参,换个内参,2,bca法测蛋白浓度还是有差异的,你可以根据这个内参,然后读个灰度值,再重新调一下内参
4 回答
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问
外泌体提取?提外泌体怎样才算的好?想请教大家一下。
府宅
WB检测可以发现样品中具有外泌体的标志物,可以一定程度上排除溶酶体、蛋白聚团、支原体等情。NTA粒径分析可以反应外泌体样品中粒子的群体特征,了解其纯度
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问
求教,大片段目的基因(6700bp)如何获取?
府宅
可以根据数据库选择表达量高的部位进行模板制备,这样的话,也比较容易扩增出来;可以分成两三段就可以了,选择合适的酶切位点;再次,选择高保真的聚合酶,这样扩增出来不容易出现突变,可以适当提高循环数,增大产量,可以设置梯度PCR,寻找最优的条件。
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问
使用鸡毒支原体作为病原菌,细胞细菌污染。
bamboopiggy
你用支原体清除剂,或者是:阿奇霉素、强力霉素,或有时左氧氟沙星或莫西沙星,试试,青链霉素对没有细胞壁的细菌没有作用的
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问
怎么计算荧光共定位效率???
天一湖医者
在ImageJ菜单下Analyze,Plot Profile(快捷键Ctrl+K)可以找到Plot Profile工具。Plot Profile只适用于线(Line)和矩形(Rectangluar)选框,表示线段和矩形选框所经过的范围内的灰度变化: 对于仅含有红绿蓝三通道RGB格式荧光图片,可在ImageJ菜单下Image,Color,Split Channels,得到Red,Green,Blue
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问
寻找多个序列的直系同源序列,如何精准查确?
Eason老歌迷
同源序列的查找,顾名思义就是我们要找的是和这个序列相似的序列,比如拟南芥,我们找到这个植物的一个序列,那就是把一个数据库当作比对的参照物,把这个一个拟南芥的序列与这个数据库进行比较,查看那些物种的序列和这个序列相似,这个是线上的方法,我们直接利用ncbi中的官网的方法比较blast。
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1909 围观
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问
关于TGF-BETA/SMAD通路的相关问题?
府宅
可使用加减三甲散及其虫药可使SMAD表达降低
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问
STR引物设计如何开始呢?
天一湖医者
引物以18~30bp为宜;引物中C+G含量宜在50%左右;引物内部和引物之间不应含有互补序列;引物的碱基顺序与非扩增区域的同源性应小于70%;引物的3’末端与模板DNA一定要配对,但末端没有严格的限制,故引物设计时可在5’末端加上限制性内切酶位点和/或启动密码ATG等;引物合成后必须纯化以去除合成产物中的不完整序列、脱嘌呤产物、碱基修饰链等“杂质”;引物的终浓度一般为0.2~0.5μmol/L,过
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1975 围观
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问
目的基因ct和外参ct
天一湖医者
可以用,不同基因之间表达量差异很大,可达上千甚至上万倍之差,所以CT值差10以内属正常现象。
2 回答
626 围观
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问
请问各位大佬知道为什么我的PMB单独加到培养液里RAW细胞没有反应,但是跟我的一个蛋白混合后加就会引起细胞的炎性反应吗?
天一湖医者
有可能是血清浓度问题,或者是培养液有问题。,
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问
真菌培养过程中所用培养基调整ph值后不易凝固
生如夏花zzh
酸度过高也可能导致培养基溶解。再试试看
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问
想知道同源重组对于链霉菌有什么特殊需要注意的吗
府宅
用硫链丝菌素抗性基因作为筛选标记,可以简单直接地获得可能发生同源重组的菌株,以便进一步从分子水平上用杂交进行验证
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问
我做流式的时候,总是有非特异性染色,该如何避免
生如夏花zzh
排出一下是否有大量死细胞。重复性实验。
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问
求助PCR条带问题?
dxy_2cic6tye
用的多大浓度的胶?目的片段大的话,胶浓度应该低。另对照样本跑的怎么样?marker图谱是否正常
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