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问
移除小鼠回肠组织后,保存前需要如何处理?
天一湖医者
保存的目的是什么,如果用病理或组化,可以用固定液固定,或者先放液氮,然后再转入冰箱冷冻,不过长期保存也是有时时间的,不知道你想保存多久。
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问
细胞BSA蛋白定量怎么调整啊,每次跑出来条带都歪?
天一湖医者
我觉得有两种可能:一、做胶时没有充分混匀二,上样buffer 可能有问题
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问
wb同样的蛋白样品,跑三块胶,为什么有的内参齐,有的内参不齐?
天一湖医者
一般是跑胶时电流或电压太大。还有可能是样品中参杂着盐离子等其他物质也会造成跑不齐。
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问
乳剂状疫苗如何提核酸。
天一湖医者
乳剂状疫苗可以用离心柱法提核酸。
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问
小白做+WB
天一湖医者
减少抗原上样量,降低一抗浓度,改变一抗孵育时间和温度
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问
WB条带连一起是什么原因?
天一湖医者
wb时连成一条线可能有以下几种原因:1)上样量过大 这里指的是质量数过大,一般上样在20-100ug之间就可以,楼主可以减半上样量,试试看。2)一抗孵育时间过长,适当缩短孵育时间,也可以改善。3)一抗浓度过大 ,抗体如果很好用的话,增大稀释比例试试。4)曝光时间过长,同样会由此现象。但是这其中,上样量影响最大,建议楼主其他条件不动,减少上样量试试,可以减少一半。
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问
请教小鼠小肠组织的处理及短暂保存?
天一湖医者
如果用病理或组化,可以用固定液固定,或者先放液氮,然后再转入冰箱冷冻,不过长期保存也是有时时间的。
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问
请问,细胞ELISA中空白细胞本地比实验组OD还好是为什么,OD一般控制范围在多少合适呐?
Eason老歌迷
正常情况是样品OD值和空白孔OD值都比较低,样品OD值略低于空白孔OD值。一般od值控制在2左右
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问
WB背景很脏怎么办?
申东熙老伯
封闭久一点,可以用牛奶4℃封闭过夜,降低一抗浓度。
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问
WB 转膜后的pvdf 膜保存。
秋秋欣欣
放在TBST 里4度保存,几天没有问题
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问
提取内质网沉淀如何非变性溶解?
天一湖医者
在提取后的蛋白沉淀中加入适当量的溶解液,加入溶解液的体积需要根据蛋白沉淀的大小以及下游实验所需的蛋白浓度决定。
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问
免疫组化结果到底准不准?感觉DAB多染一会儿就阳性了
秋秋欣欣
免疫组化结果准啊,采图的时候肯定要对比着采图对照和阳性都需要看到,才能具有说服力
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问
转膜后,如何选择抗体,敷抗体的时间怎么把握?
Eason老歌迷
根据你跑的目的蛋白选择一抗,然后二抗的话就根据你选的一抗种属来选择,一抗是鼠的就选抗鼠,一抗是兔的就选抗兔。一抗一般都是4℃孵育过夜。然后二抗常温孵育1.5h,别孵育太久。你可以做几次预实验,调整一下孵育时间,看看什么时间最合适。
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问
BCA法蛋白定量后,内参条带仍然不齐,怎么办?
蜡笔小迟
组织定量本来靠测浓度就不准,建议:先测浓度,按浓度跑内参,然后按内参灰度调整上样量。
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问
trasnswell铺胶不均
秋秋欣欣
铺胶不均可以铺进去之后轻震几下
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问
枸杞木虱qPCR选择内参应该用什么啊? 急!!在线等!!
dxy_gwrp7ndq
ICG 数据库中收集了文献报道的各物种、组织细胞适用的内参基因。
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问
细胞污染还是正常状态?求指点
秋秋欣欣
看你细胞状态挺好的,应该不是污染,可能就是培养基里的一些蛋白质
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问
wb检测,使用B-actin归一化,还是使用用蛋白归一化准确?
秋秋欣欣
Wb检测应该使用内参归一化,可以是beta-actin
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问
转膜时没有气泡,为什么显影的时候会有像气泡一样的空泡而且很大,确定不可能是转膜时有的
Eason老歌迷
转膜没有气泡,可能就是你敷抗体的时候出了问题,是不是你有一部分膜抗体没孵上啊。
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问
如何用七氟烷处理细胞?
bamboopiggy
你这个可能要用到七氟烷挥发罐,用特殊的chamber将细胞养在里面。
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